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ELISA实验完美的加样步骤

提供者:上海劲马实验设备有限公司   发布时间:2020/4/14 11:47:22  阅读次数:752次  进入该公司店铺

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ELISA检测实验有很多关键技术点,在前面的资讯内容中也为大家介绍过不少。在昨天的技术分享内容中,劲马小编为大家带来的是最新检测要点总结,昨日下午,技术员又发来了完善优化elisa试剂盒样本加样的经验分享word文档,下面是详细内容:

一、细胞上清:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。

二、脑脊液:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。

三、血清血浆:请加入50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。

A 血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
B 血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融;
C 血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
D 标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;
E 请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。

四、组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,造成检测结果的值偏低。

因组织匀浆液的样本蛋白种类多,含量丰富,实验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验结果。具体是加入50 ul样本分析缓冲液后加50 ul标本,需稀释时,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。

因为目标蛋白不同,可能造成降解的蛋白类型可能不一样,如果实验前通过文献确定用哪种蛋白酶抑制剂,有针对性加入,可节省抑制剂。如果查不到相关文献,可采用组合抑制的办法确保蛋白不易被降解。

本文由劲马小编为您整理,了解相关ELISA试剂盒、抗体、血清、标准品、生化试剂、培养基等产品内容,欢迎您进入本公司网站商铺的产品目录展示区,了解订购可以点击在线咨询给我们发送留言或qq会话。

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