（1）取3 g样品，参加10百分之百 样品重的多聚聚乙烯pyrrole烷酮（PVPP），用液氮研磨成齑粉状，将齑粉分为每份约3 g，并储藏于-80℃下。

（2）在50 ml falcon管中参加20 ml提出取得缓和冲突液。提出取得液的组变成0.2 mol/L 脱水四硼酸钠（sodium tetriborate decahydrate）、30 mmol/L 乙二胺四乙酸（EDTA）、1百分之百 （W/V）十二烷基硫酸钠（SDS）、1百分之百脱氧气胆酸钠盐。再参加0.0309 g二硫苏糖（DTT）、200 ul乙基苯基聚甘醇（NP-40）和0.4 g聚乙烯pyrrole烷酮（PVP-40），并置于80℃下均衡15 min。抽取于-80℃中保留样品，参加热均衡后的提出取得缓和冲突液，振动混匀。再参加800 ul蛋白酶K（20 mg/ml ），盖好管盖，平放于转速为120 r/min 、温度为42℃摇床上，摇摆提出取得1.5 h。

（3）在这以后，向样品管中加人1.6 ml 2 mol/LKCl，振动混匀，将样品管置于4℃条件下1~1.5h。将提出取得液转移至玻璃离心管中，在4℃条件下以12 000×g离心20 min。取上清液置于新的玻璃离心管中，参加1/4（或1/3）大小8 mol/L LiCl（~20℃），振动混匀，于4℃安放过夜。4℃下以12 000×g离心20 min，去除上清液，RNA沉淀停留不动于管底。参加3~5 ml冷的2 mol/L （4℃）LiCl，轻缓振动，4℃下以12 000×g离心10 min，去除上清液。重复2 mol/L LiCl清洗2~3次，一直到上清中无色素类事物。

（4）用2 ml 10 mmol/L。Tris-HCl（pH 7.5）充分溶解沉淀，4℃下以12 000×g离心10 min，去除不溶性的沉淀，将上清液转移至15 ml玻璃离心管中，参加200 ul（1/10大小）的2 mol/L CH3COOH钾（pH 5.5）。于4℃温浴中放30 min。4℃下以12 000×g离心10 min。将上清液转移至新的玻璃离心管中，参加2.5倍大小的100百分之百 酒精，摇匀并置于-80℃条件下沉降RNA 1~2 h。

（5）4℃下9 800×g离心30 min，去除上清液，RNA沉淀停留不动于管底。用1~2 ml 70百分之百冷酒精（-20℃）清洗沉淀，4℃下9 800×g离心5 min，去除上清液。室温下干燥RNA沉淀（20~30 min）至管内无水珠。

（6）用200 ul通过焦碳酸二酒精（DEPC）处置的超纯水充分溶解沉淀。溶解液绝对转移至1.5ml离心管中，再用100 ul通过DEPC处置的超纯水清洗原管壁和管底，将清洗液合并于RNA溶解沉淀中，参加1/10大小3 mol/L CH3COOH钠（pH5.2）和2.5倍大小的100百分之百 冷酒精，混匀后安放于-20℃沉降RNA 1 h。混合液在4℃下以16 000×g离心30 min，去除上清液，用1~2 ml 70百分之百 冷酒精（-20℃）清洗管底停留不动的RNA沉淀，4℃下以9 800×g离心5 min，去除上清液，RNA沉淀停留不动管底。

（7）RNA沉淀于室温下干燥20~30 min。用数量适宜通过EDPC处置的超纯水（100~300 ul）溶解RNA沉淀，RNA液置于-80℃条件下可长时期保留，或用于剖析。