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十月尾声:看elisa试剂盒如何突破天界

提供者:上海劲马实验设备有限公司   发布时间:2018/10/30 9:21:26  阅读次数:734次  进入该公司店铺

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elisa试剂盒在科研领域一直以灵敏度高和特异性强的特点稳扎脚跟,说起检测试剂,那没有比elisa试剂盒的操作步骤和技巧来的更清晰。在以往的文章中,劲马小编不止一次为您解析过试剂盒的操作步骤及技巧,不知您是否还有印象?如果不记的话没有关系,今天就为您再次做一次总结,请看好啦!
操作步骤
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

操作技巧
1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

2.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

3.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。

4.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。

5.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。

6.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。

7.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。

8.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。

9.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。

10.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。

以上呢,就是为您总结的zui新有关elisa试剂盒的操作步骤和实验技巧,如果您有需要,可以进行借鉴与参考,当然一切数据以实验中检测出来的数据为准,文章操作步骤与技巧只是做参考作用,如果您在实验中遇到任何疑惑,都可电话咨询我司技术专员,我们会为您的答疑解难!想了解更多内容,可来电咨询我司业务员,我司拥有优质的产品和完善的服务,为您的实验保驾护航!


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