ELISA实验土壤/植物样本的处理方法

植物标本的精采集及保存
1、 称取0.1g（误差±3%以内）新鲜植物组织样本，在液氮中充分研磨；
2、 加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度过夜；
3、 于4度，8000rpm，离心1小时，取上清；
4、 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%yimi（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干，保存备用；

5、 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液（1ml定容）。混匀后室温放置30分钟，然后4度离心（8000rpm，15分钟），取上清并暂时保存于4度待用。

6.植物标本中相关酶或蛋白的测定：（粗提取）
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨；
2、 加入样品体积9倍的提取液（pH 7.4 PBS缓冲液）,3、 请于4度，8000rpm，离心30分钟，取上清并暂时保存于4度待用。

土壤：称取1g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。分装一份待检测，其余冷冻备用，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。如果是测分泌蛋白，直接取上清检测，测试细胞内蛋白，要破碎细胞。