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合成的引物应如何保存

提供者:上海谷研实业有限公司   发布时间:2017/11/9 10:47:02  阅读次数:1721次  进入该公司店铺

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刘**
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合成的引物应如何保存?
没有溶解的引物非常稳定,可以在-20℃下保存至少1年,溶解好的引物可以事先稀释为100μmoL/L的储存液,分装数份保存于-20℃冰箱,可以保存至少半年以上(反复多次冻融会降低使用寿命)。使用前,将浓溶液稀释成工作液(10 pmol/ml或20 pmol/ml)后进行实验。

如何检测引物的纯度?
实验室方便的作法是用PAGE方法。使用加有7M尿素的一定浓度的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳,<12个碱基的引物用20%的胶,12-60个碱基的引物用16%的胶,>60个碱基的引物用12%的胶,取0.2OD左右的引物,用尿素饱和液溶解或引物溶液中加入尿素干粉直到饱和,上样前加热变性(95oC,2mins)。加入尿素的目的一是变性,二是增加样品比重,容易加样。600V电压进行电泳,一定时间后(约2-3小时),剥胶,用荧光TLC板在紫外灯下检测带型,在主带之下没有杂带,说明纯度是好的(有时由于变性不充分,主带之上可能会有条带,乃是引物二级结构条带)。

一般的合成的引物在5'和3'末端有磷酸基团吗?

没有,5'和3'末端均为-OH基。如需要加磷酸基团,订货时请特别注明,此时需收取磷酸化的费用。

HPLC法含量测定 140666-200501 50mg
HPLC法含量测定 140667-200601 20mg
含量测定 140668-200301 10mg
HPLC法含量测定 140669-200903 50mg
鉴别、HPLC法检查 140670-200501 4mg
含量测定 140671-200501 100mg
含量测定 140672-200501 100mg
供鉴别及含量测定用 140673-201006 100mg
鉴别 140674-200401 10mg
HPLC法含量测定 140675-200803 50mg
含量测定 140676-200405 50mg

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