提供者:南京亿迅生物科技有限公司 发布时间:2017/8/3 12:18:45 阅读次数:3586次 进入该公司店铺
肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)可分为TNF α和TNFβ两种,前者来自单核巨噬细胞,后者由活化T细胞产生,是具有重要生物活性的细胞因子。存在于细胞上的TNF 受体主要有两种:TNFRⅠ和TNFRⅡ,血清中存在的是可溶性的TNFR(s TNFRⅠ, s TNFRⅡ),它们的相互作用不仅对多种肿瘤细胞有细胞毒作用,还与炎症和发热反应、关节炎、败血症及多发性硬化等疾病有密切关系。
TNF-α是一种单核因子,主要由单核细胞和巨噬细胞产生,LPS是较强的刺激剂。IFN-γ、M-CSF、GM-CSF对单核细胞/巨噬细胞产生TNF-α有刺激作用,而PGE则有抑制作用。前单核细胞系U937、前髓细胞系HL-60在PMA刺激下可产生较高水平的TNF-α。T淋巴细胞、T细胞杂交瘤、T淋巴样细胞系以NK细胞等在PMA刺激下也可分泌TNF-α。SAC、PMA、抗IgM可刺激正常B细胞产生TNF-α。此外,中性粒细胞、LAK、星状细胞、内皮细胞、平滑肌细胞亦可产生TNF-α。
鼠肿瘤坏死因子(TNF)elisa试剂盒试剂组成
(1)包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):
Na2CO3 1.59克
NaHCO32.93克
加蒸馏水至1000ml
(2)洗涤缓冲液(PH7.4PBS):0.15M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·12H2O2.9克
NaCl8.0克
KCl0.2克
Tween-200.05%0.5ml
加蒸馏水至1000ml
(3)稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗涤缓冲液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5~10%使用。
(4)终止液(2MH2SO4):
蒸馏水178.3ml,逐滴加入硫酸(98%)21.7ml。
(5)底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):
0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml
0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。
(6)TMB(四甲基联苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml
底物缓冲液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O232μl
(7)ABTS使用液:
ABTS0.5mg
底物缓冲液(PH5.5) 1ml
3%H2O22μl
(8)抗原、抗体和酶标记抗体。
(9)正常和阳性对照血清。
elisa试剂盒中有哪些器材
(1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。
(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
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