提供者:南京金益柏生物科技有限公司 发布时间:2017/7/14 11:40:00 阅读次数:880次 进入该公司店铺
透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)是使用最为广泛的一类电镜。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万到几十万倍。目前透射电镜已经广泛的应用到癌症研究,病毒学研究,微生物学,细胞学研究等生物领域。
二、实验原理
透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50~100 nm)。要在机体死亡后的数分钟内取材,组织块要小(1mm3以内),常用戊二醛和双重固定,包埋介质包埋,用超薄切片机切成薄片,再经醋酸铀和柠檬酸铅等进行电子染色。
三、实验流程
1.取材
2.固定
3.脱水
4.包埋
5.固化
6.超薄切片机切片(50-60 nm)
7.3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
8.透射电镜观察,拍片
四、客户提供
组织块、细胞等
五、公司提供
基本实验步骤、药品、样品处理、图片及图片分析
实验周期:2-3周
六、透射电镜取材注意事项
取材是电镜样品制备的第一步,也是十分重要的一步。其操作成功与否直接关系到整个实验的成败。 为了得到好的结果,请务必认真做好最关键的第一步取材。因取材不规范导致实验失败本公司概不负责!取材基本要点:快(1min)、冷(4 ℃)、小(1mm 3 )、净(无杂质)、准(部位准确)
动植物 组织取材流程及要求:
取材流程: 动物麻醉后,快速取出需要检测的组织,将组织切成 1 mm 3 左右小块,固定于 2.5%戊二醛固定液 4℃过夜后快递。植物组织除麻醉外,其他操作相同。4.保持低温环境:为降低自溶酶活性,最好在 4℃低温条件下取材,容器和器械预冷;将修整好的标本块放入戊二醛固定液后,普通 4℃冰箱保存。细胞取材流程及要求
取材流程: 细胞直接刮下,细胞悬液离心,弃上清,PBS 清洗 2 次,离心成团,加入 2.5%戊二醛固定液 4℃过夜后快递。悬浮细胞、菌液可直接视为细胞悬浮液操作。
固体培养基培养的菌可直接将菌落挑到 PBS 中,后续操作一致。① 凡本网注明"来源:阿仪网"的所有作品,版权均属于阿仪网,未经本网授权不得转载、摘编或利 用其它方式使用。已获本网授 权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:阿仪网"。违者本网将追究相关法律责任。
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