小鼠外周血淋巴细胞分离液KIT
【产品规格】
200ml/Kit
【实验前准备】
适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
首先取抗凝血按体积比 1:1 的比例与样本稀释液混匀，根据稀释后的样本量大小，
情况 A：稀释后的血液样本量小于 5ml 时，实验方法如下：
1. 取一支 15ml 离心管，先加入与稀释后样本等量的分离液（注：分离液最少不得少于 3ml）。
2. 用吸管小心吸取稀释后的血液样本加于分离液液面上，400-500g，离心 20-30min（注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。
3. 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一 15ml 离心管中，往所得离心管中加入 10ml 清洗液，混匀细胞。
5. 250g，离心 10min。
6. 弃上清。
7. 用吸管以 5ml 清洗液（产品编号：2010X1118）重悬所得细胞。
【注意事项】
1. 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
2. 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。
3. 吸取过多的淋巴细胞层及分离液层会导致分离液交界处的粒细胞被吸出从而使混杂的粒细胞数量增加。
4. 吸取过多的淋巴细胞层上层溶液会导致血浆蛋白及血小板混杂。
【参考值（参考范围）】 本实验淋巴细胞提取率及纯度均大于 80%。 下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。 红细胞 白细胞 血小板 含量（个/L） （4.0-5.5）×1012 （4.0-10.0）×109 （1.0-3.0）×10 中性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 11 50%-70% 20%-40% 3%-8%
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