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RTS DH5a感受态细胞

提供者:上海圻明生物科技有限公司   发布时间:2022/7/8 14:01:07  阅读次数:97次  进入该公司店铺

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RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞独有的化学感受态利技术制备,其室温可保存3天、-20°C可保存2年(推荐保存温度)、-80°C可保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。RTS克隆感受态细胞均为热激感受态细胞,用于TA/平端/酶切连接的载体构建(不可用于无缝克隆载体构建),经42°C热激1min可获得106~108cfu/μg效价, 该系列感受态细胞使用简单、运输、储存方便。
应用
质粒转化、DNA克隆、DNA测序
储存
RTS系列感受态为干粉形式,均可室温保存3天,保存-20°C(2年)。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后,并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融,在-60°C以下可保存6个月。
操作方法
1.从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent都融化,放置于冰上。取300 μl Nano E.coli Transfection Reagent加入到一支冻干感受态细胞中,并分装到10支1.5 ml EP管中(每支30 μl),于-60°C以下保存(或立即使用)。
2. 将5 μl连接产物加入到分装的感受态细胞中,轻弹EP管(或枪头轻轻吹打),置于冰上15min。
3. 置于42°C热激1min后,迅速置于冰上急冷2min。
4. 热激完毕后,向上述感受态细胞中加入450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培养基,37°C振荡(225 rpm)培养60min。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
5. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
6. 将平板置于37°C培养,12~18小时后可出现菌落。

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