关于使用培养基时，培养者常出现以下3个问题：
1. 放置在冰箱中的培养基几天后颜色变紫是什么原因？
培养基保存于4℃冰箱中，培养基内的CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性，而培养基中酸碱指示剂（通常为酚红）的颜色也会随碱性增加而偏紫。培养基偏碱将造成细胞生长停滞或死亡。可以在使用前松开瓶口，在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟，来校正溶液的pH值（确定松开瓶口以保证气体的交换）。
2. 能否用其它培养基替换说明书上推荐使用的培养基？
不建议替换。每株细胞均有其特定使用且已适应的培养基，而且经过一定时间驯化后，若骤然改变培养条件，细胞有可能出现不适应，表现出生长缓慢、颗粒增多、死细胞出现，造成细胞无法存活；也有些细胞在更换培养基后也能正常的生长，细胞状态也能维持，但问题会出现在冻存后期的复苏过程，有可能细胞没法复苏，所以不建议随便更换培养基。
3. 是不是培养基中都要添加L-glutamine（L-谷氨酰胺）？
对于所有的哺乳类动物细胞而言，L-glutamine（L-谷氨酰胺）是一种必须氨基酸。所有固体包装的培养基都含有L-glutamine，但L-glutamine在溶液中不稳定、易分解，商品化的液体培养基不含L-glutamine。所以不含L-glutamine或L-glutamine已经降解（含有L-glutamine的培养基在4℃贮存两周以上）的培养基，应在使用前加入适量的L-glutamine。各种培养基的L-glutamine的浓度不同，如M199含有0.68mM的L-glutamine，DMEM含有4mM的L-glutamine。
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