流式细胞计的技术指标
仪器的技术指标是反映仪器性能的定量数据,流式细胞计由于技术复杂、涉及尖端学科,是综合的高技术。因此,用少量指标不易全面反映整机的技术状况。又由于使用的目的不同,侧重点液不同。在此,我们提出下面几个指标作为参考“
1、荧光分辨率
表明仪器测量所能达到的最大精度,通常用变异系数表示。显然它与被测标准样品有关,必要时要注明。目前仪器的荧光分辨率都在2.0%以下。
2、荧光林敏度
以能检测到最少的FITC分子来表示,即微球上最少标有多少个FITC分子时刚好能被检测到,既定义为荧光林敏度。一般仪器均可在标有3000个FITC分子时即检测出,即荧光灵敏度为3000个FITC分子。
3、前向角散射光灵敏度
以前向角散射光最小能检测到的颗粒直径表示。一般仪器可检测的最小颗粒直径在0.3um左右。
4、前向角散射光分辨率
以变异系数表示。一般约在2.0%,但多数厂家不给出此值。
5、分析/分选速度
分析速度可达每秒5000—10000个细胞,分选速度为每秒5000个细胞通过测量区。实用时为保证分析或分选精度,常在每秒1000个以下。
6、分选纯度
分选纯度是个比较复杂的问题,它不但与仪器精度有关,而且与被分选的亚群在整个群体中的相对位置也有关系。如果被分选的亚群在直方图或二维点图上可清晰地分辨出来且与其他亚群无重叠,则分选结果的纯度就高,反之则低。例如,晚S期细胞与G2M有较多重叠,故对晚S期细胞分选纯度不可能很高;而中S期细胞与其他时相无甚重叠,这时的纯度就依赖仪器的精度。所以,分选纯度在仪器灵敏度确定以后并无多大实际意义。然而制造商又常常专门介绍此指标,且声称纯度达99%,这是要注意的。
7、分选收获率
收获率定义为通过测量区应被分选的细胞如果有100个,实际落到指定收集器中的数目为95个,则称收获率为95%。一般应在90%以上,既有90个以上的细胞被收获。收获率与分选纯度是互相制约的。纯度低,收获率高;纯度高,收获率就低。
除以上7个参数外,还有样品浓度,同时可测参数、光源、喷孔尺寸、计算机配置等参数或指标,这些一看便知,无庸解释。
现在世界上生产流式细胞计的主要厂家是美国Becto n-Dickinson和Coulter两家,以前还有Ortho,产品也很多,但1988年已为B-D公司兼并,此外,设在瑞士的Pertec公司生产PAS系列,法国、挪威、日本、西德等国都有产品出售,我国的北京、上海也都有人研制并通过了鉴定。现将B-D公司和Coulter公司主要产品性能列表以供参考。其外观形状见封面及图版。

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