谷草转氨酶（GOT）活性测定试剂盒说明书
分光光度法 50 管/24 样
测定意义
GOT（2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT 在心肌细胞中含量最高，临床上一般常作为心肌梗塞和 心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
测定原理
GOT 催化 α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸；丙酮酸可与 2,4-二硝基苯肼反应生成 2,4-二硝基苯腙，在碱性条 件下显棕红色；测定 505nm 吸光度的变化，即可计算 GOT 酶活力。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸 馏水。
试剂的组成和配制
提取液：液体 30mL×1 瓶，4℃存。 试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃存； 试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃存； 试剂三：液体 50 mL×1 瓶，4℃存；
测定操作表
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 505nm，蒸馏水调零。 2、在 EP 管中加入下列试剂
试剂名称（μL） | 测定管 | | 对照管 |
| | | |
待测样本 | 20 | | |
| | | |
试剂一 | 100 | | 100 |
| | | |
混匀后，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）预热 30min | |
| | | |
试剂二 | 100 | | 100 |
| | | |
待测样本 | | | 20 |
| | |
混匀后，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）准确水浴 20min |
| | | |
试剂三 | 1000 | | 1000 |
混匀，室温放置 10min，在 505nm 波长处，测各管吸光度。每个测定管需设一个对照管。
计算
1、以相对吸光值（A 测定管-A 对照管）为横坐标，相应酶活力单位（U/L）为纵坐标。作标准曲线为：y=（605.07χ2+192.86χ+0.1392）×0.482
2、血清中 GOT 活力（U/L）= 0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）。χ为 A 测定管-A 对照管。 3、微生物、细胞或组织中 GOT 活力（U/g 蛋白）=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）÷待测匀浆蛋白浓度（g/L）。χ为 A 测定管-A 对照管。
来源于青岛捷世康：www.jisskang.com
版权声明