产品规格：48T/96T检测范围：5pg/ml-300pg/ml
使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中可溶性磷脂酶 A2（sPL-A2）含量。
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性磷脂酶 A2（sPL-A2）水平。用纯化的人可溶性磷脂酶 A2（sPL-A2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入可溶性磷脂酶 A2（sPL-A2），再与 HRP 标记的可溶性磷脂酶 A2（sPL-A2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值）， 通过标准曲线计算样品中人可溶性磷脂酶 A2（sPL-A2）浓度。 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 200pg/ml 5 号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
100pg/ml 4 号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
50pg/ml 3 号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
25pg/ml 2 号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
12.5pg/ml 1 号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）ELISA试剂盒注意事项：
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
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