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间接法操作elisa试剂盒

提供者:上海抚生实业有限公司   发布时间:2015/10/16 15:18:23  阅读次数:201次  进入该公司店铺

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间接法用于检测未知抗体的elisa试剂盒

elisa试剂盒步骤如下:
1.首先用包被缓冲液将已知抗原稀释到1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.第二日日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育30-60分钟,洗涤;  6.’最后一遍用DDW洗涤。
6.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
7.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
8.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

操作以上步骤完毕后,就可以知道结果了。
phospho-ILK-1(Ser246) 磷酸化整合素连接激酶1抗体
phospho-ILK-1(Ser259) 磷酸化整合素连接激酶1抗体
phospho-IRS1(Thr176) 磷酸化胰岛素受体底物1抗体
phospho-ICAM1(Tyr512) 磷酸化细胞间粘附分子1抗体
phospho-ITGB3(Tyr785) 磷酸化整合素β3抗体
phospho-IGF1R (Tyr980) 磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体
phospho-IGF1R (Tyr1280) 磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体
phospho-IGF1R (Tyr1165 + Tyr1166) 磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体
phospho-ITGB3(Tyr773) 磷酸化整合素β3抗体
IGIP 免疫球蛋白A诱导同源蛋白抗体
IL-2 白介素2抗体
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ID4 DNA结合抑制因子4抗体

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