欢迎来到 阿仪网

免费注册

首页|产品|求购|资讯|专题|找厂商|打听|品牌|资料|技术文献|展会|新品|促销|招标|优质仪器
广告

细胞感染方法

提供者:上海邦景实业有限公司   发布时间:2015/9/21 15:34:12  阅读次数:167次  进入该公司店铺

商家名片
陈**
请说明是阿仪网看到我的,谢谢!
  • 公司:上海邦景实业有限公司
  • 电话:02*******894
  • 手机:13******131
  • 微信:***
  • 交换名片后展示联系方式

交换名片

细胞我们实验室不可缺少的实验产品之一,那么细胞感染是什么东西引起?有了细胞感染要注意那么方面?上海沪峰今天就为大家分析细胞感染的方法。
(一)细胞准备
将状态良好的目的细胞接种到24孔板,使细胞浓度为 1×105/ml 细胞,接种细胞数量因细胞的生长速度而略有不同, 一般是保证第二天进行病毒感染的时候细胞汇合率介于 50%至70%之间。
(二)病毒感染
1.感染细胞最佳MOI 的测定MOI(Multiplicity of Infection,感染复数)是指每个细胞感染的病毒数,通常MOI 越高,病毒整合到染色体的数量以及目的蛋白的表达量越高。对于分裂活跃的细胞,比如 Hela、293 细胞,MOI=1~3 时,80%以上的细胞均表达目的基因。而对于非分裂细胞,比如原代细胞,感染效率较低。需要进行MOI梯度摸索实验,选择适合的MOI 进行实验。
2.感染步骤
按实验需要将细胞铺板(比如12孔板);细胞数以第2天密度约50%为宜;37℃ 培养过夜。
对于Polybrene 可施加的细胞:准备完全培养基和 Polybrene混合物,Polybrene 终浓度为摸索得到的最适终浓度。移去培养基并添加 0.5 ml Polybrene/培养基混合物于每孔中(适用于24 孔板,其他孔板请相应调整体)。
对于不适用 Polybrene 的细胞,以上步骤省略,直接进入下面步骤:
感染前,从冰箱取出并在 37℃水浴中快速融化病毒,吸去细胞原有培养基,将病毒原液加入细胞中,轻轻8字混匀。感染后第二天(约12小时),吸去含病毒的培养液,换上新鲜的完全培养液,继续37℃培养。感染后48小时,对于带 GFP报告基因的病毒,可通过荧光显微镜观测GFP表达效率,对于携带 Puromycin抗性基因的病毒,换上含适当浓度的 Puromycin 的新鲜完全培养液,筛选稳定转导的细胞株。

优质商品

X射线荧光光谱仪
X射线荧光光谱仪

版权声明

① 凡本网注明"来源:阿仪网"的所有作品,版权均属于阿仪网,未经本网授权不得转载、摘编或利 用其它方式使用。已获本网授 权的作品,应在授权范围内使用,并注明"来源:阿仪网"。违者本网将追究相关法律责任。

② 本信息由注册会员:上海邦景实业有限公司发布并且负责版权等法律责任。

旗下频道

色谱仪光谱仪反应釜试验箱试验机搅拌器培养箱离心机水分测定气体检测量热仪石油仪器纯水器比表面仪温度记录泵流量计万用表显微镜粒度仪测厚仪硬度计酸度计元素分析生物试剂电线电缆天平衡器传感器食品检测压力仪表电化学测厚仪阀门仪表电力仪表干燥设备药物检测