ELISA试剂盒步骤绝招在手，实验有何难？_技术交流_仪器仪表技术文献

ELISA试剂盒步骤绝招在手，实验有何难？

提供者：上海劲马实验设备有限公司发布时间：2015/9/7 9:24:33 阅读次数：804次进入该公司店铺

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ELISA试剂盒检测试剂厂家较多；不同厂家出产的试剂灵敏度与特异性存在一定的差别，使用质劣的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。因此，选择高质量的试剂是保证结果准确的关键之一。
操作技术的影响
吸量不准确，直接影响检测结果。因此加样器也要经常清洗，定期校准。
温育影响
抗原抗体结合及酶促反应对温度有严格要求，酶标板周围与内部孔升降温速率不同，造成周边与内部孔结果差异；干浴与水浴存在明显的差异，尽可能使用水浴，并要求固相板放入水中，减少受热不均，贴密封膜，防止污物浸入。
加样次序影响
有时我们在加样过程中，常常会遇到个别标本未离心等情况，为了节约时间，往往这时我们会先加酶结合物，然后等标本分离好后再加标本，这样，竟常常会造成HBeAb和HBcAb的假阴性。因为HBeAb和HBcAb都是竞争抑制法，先加入酶标记的抗体，首先与固相载体上的抗原结合，待加入显色剂后，因酶的存在而显色，故呈阴性。

综上所述，对临床检验ELISA测定中出现的假阳性或假阴性结果，要从多方面进行分析除试剂因素和操作因素之外，更多的应从标本因素方面进行分析，并采取相应措施排除干扰作用。
并且严格按照ELISA试剂盒注意事项操作。
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
我司提供免费检测服务：使用我司Elisa试剂盒,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费。我们将根据实验工作量和难易程度，双方协定实验周期，保质保量完成委托实验，并将实验结果和材料用特快专递免费寄送到您手中。欢迎来电订购！