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采用双抗体夹心法测定人脂联素含量分析

提供者:上海劲马实验设备有限公司   发布时间:2015/6/10 9:11:40  阅读次数:1091次  进入该公司店铺

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脂联素(adiponection,ADP)是脂肪细胞特异性分泌的激素样蛋白质,具有增加胰岛素敏感性、抗糖尿病和抗动脉粥样硬化、抗炎症等生物学效应。上海劲马生物提供人脂联素elisa试剂盒仅供科研使用,定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中人脂联素(ADP)的含量。
人脂联素Elisa试剂盒是采用双抗体夹心法测定人脂联素(ADP)水平。用纯化的人脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相载体,实验时依次在微孔板中加入样本及标准品,并加入HRP标记的ADP抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,反复洗涤后加底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再用硫酸终止反应,转变成黄色。颜色的深浅和样品中的ADP含量呈正相关。采用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值),根据标准曲线,计算测试样品中ADP浓度。
人脂联素检测试剂盒操作步骤:
1. 间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
1.将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2.加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
3.加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
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