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酶切位点怎么选择?

提供者:江苏晶美生物科技有限公司   发布时间:2015/1/15 8:51:59  阅读次数:1975次  进入该公司店铺

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酶切位点的距离太小(小于10bp),会影响限制性内切酶对切点的识别,不利于空载体的双酶切,会切不开!
在酶的切位点的选择有下面几点的要求:
(1)一般目的基因用于克隆表达的情况下,酶切位点的选择要考虑到:目的基因片段内部不含有所选的酶切位点,不然鉴定阳性重组子双酶切时会将目的基因切断。
(2)实验后继应用的所有载体(真核、原核、酵母、昆虫)都尽可能含有所选的酶切位点.并且要保证在载体上的插入方向正确(定向克隆)。不然换载体表达时,还要重新设计引物,以引进新的酶切位点。
(3)尽可能选比较常用的酶切位点,常用切点酶的价格比较便宜。

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