口蹄疫病毒O型（FMDV-O）抗体检测试剂盒说明书

一、介绍：

口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的急性、热性高度接触性传染病，主要侵害偶蹄兽，一旦发病，将会引起严重的经济损失。口蹄疫病毒属于微核糖核酸病毒科口蹄疫病毒属，目前已知共有7中血清型，即O型、A型、C型、SAT1、SAT2、SAT3和亚洲1型。

口蹄疫病毒（FMDV）感染或免疫后，产生抗体的主要中和表位在VP1蛋白的siteA（141-160），国际兽医局（OIE）规定的血清学检测方法是病毒中和试验和阻断ELISA，ELISA检测方法能够检测特定血清型抗体，不仅敏感性和符合性非常好，而且检测速度快，稳定好。

韩国金诺VDPro FMDV-O型抗体检测试剂盒是通过阻断ELISA，检测O型中和抗体，用重组FMDV rP13C蛋白包被，抗VP1蛋白A位点单抗为酶标抗体。在免疫地区能够用来做抗体监测和免疫效果评估。适用对象包括猪、牛、山羊以及绵羊等。

二、试剂盒组成：

三、注意事项：

1、使用之前请仔细阅读使用说和操作明；

2、试剂盒储存条件：2-8℃；

四、实验前准备：

1、洗液10倍稀释：如20ml洗液，加入180ml去离子水混匀，备用。

2、TMB底物：使用前恢复到室温，因为低温可能导致不显色。

五、操作步骤：

1、使用前将试剂盒所有组件恢复到室温，取出抗原包被板；

2、标记好样品、阳性对照和阴性对照（对照各做两孔），每孔加入样品稀释液80ul，然后加入样品血清、阳性对照、阴性对照各20ul；

3、室温孵育60分钟；

4、洗板：每孔加入洗涤液300ul ，洗涤3次，最后在吸水纸上拍干；

5、每孔加入100ul酶标抗体，室温孵育60分钟；

6、重复步骤4，洗涤3次；

7、每孔加入TMB底物反应液100ul，室温暗处放置15分钟；

六、读数：

每孔加入50ul终止液，在酶标仪450nm波长处读数。

七、结果判定：

1、实验有效性判定

阴性对照OD值≥0.6 阳性对照OD值≤0.3

2、判定标准：

S/N值的计算方程式： S/N=【样品值/阴性值】

S/N值≤0.60 判为阳性； S/N值＞0.60 判为阴性；

注：如果检测结果可疑，对样品进行再次检测；