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血红蛋白的测定

提供者:上海诺渊实业有限公司   发布时间:2012/11/9 8:55:30  阅读次数:1485次  进入该公司店铺

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实验目的:

了解XF-1B型血红蛋白仪的使用方法,掌握血红蛋白的测定技术。有训练运动员在较

好训练效果的影响下血红蛋白正常值高于正常成年人,因此,血红蛋白的测定是评价训练

效果的重要指标。

实验原理:测定血红蛋白的方法很多,常见的有直接比色,光电比色法,沙利氏比色

(间接比色法)。我们现在实验室用的是XF-1B型血红蛋白仪,此仪器采用氰化高铁法,

应用光电比色的原理测定血红蛋白的值,其原理是:将全血样品20ul诸如5oml氰化高铁血

红蛋白稀释液内(亦称文—齐氏液),做251倍稀释,溶解红细胞释放出血红蛋白,再转化

为氰化高铁血红蛋白。然后,再用XF—1B型血红蛋白仪直接测定显示浓度数,不需要任何

换算(每次测定只需5s).

实验器材:

XF—1B型:注意每次测试前后都要用蒸馏水冲洗仪器流通池。

一次性血细胞吸管(刻度10-20ul):注意持握端和进样端的区别。

采血针:注意针帽是否松动,每人每次扎针用一根采血针。

75%酒精,消毒棉球:消毒的时候先用酒精棉球,再用干棉球,消毒方向是呈螺旋

状,由里到外,消毒过周围的不能再消毒中心的。

培养皿:盛装消毒棉球,打开培养皿盖子,之后,手不可以在打开培养皿后的垂直上

方活动。烧杯:盛装蒸馏水。

可调加液器:盛装血红蛋白稀释液,每次取液量为5ml,上面已经固定了5ml的刻度,

把盖子提到不能再提,压到不能再提。

试管架:放置试管。

血红蛋白测定试剂:溶解红细胞,释放血红蛋白,将血红蛋白转变成高铁血红蛋白,

再转化为氰化高铁血红蛋白。

氰化高铁血红蛋白标准液:用于XF-1B型血红蛋白仪定标。

血细胞吸管吸球:拇指和中指捏住吸球两侧,食指堵住胶头顶部的孔,中指掌握按

压,每次先放食指,再释放拇指和中指。

实验步骤:

1

插上电源,打开血红蛋白仪电源开关,按动进样开关,重复三次吸入蒸馏

水,并通电预热20-30min。观察显示是否为“零”。(按出Hb仪器左下角“测试—定标

”按键,使之处于“测试”状态。)

2

取试管一支,加入Hb测试试剂5ml,放在试管架上备用。

3

采血、比色:选消毒,再用采血针在耳针或无名指指尖处采血,用干棉球擦

去第一滴血,待第二滴血自然流出一大滴时,用血细胞吸管取血液20ul,(习惯内部可

有气泡,否则需重新采血)。擦去吸管外血液后,轻轻吹入测定管底部,并回吸数次

洗净吸管,然后充分混合均匀。待5min,置Hb仪上比色。

4

记录:直接读数,记录下来。

Hb值通常以每100ml血液中含Hb若干克来表示。(g/ml)。

本仪器采用国际单位制(g/L),可直接显示Hb值(g/L)。

我国正常成人,男子:约120-160g/L,女子:约110-150g/L,男运动员不超过

:170g/L,女运动员不超过:160g/L。

注意事项

1

每人每次测试前应先将Hb仪进样处吸入蒸馏水,冲洗流通池。使显示值为

“000”。

2

比色前将仪器前部左下角“测试——定标”键置于测试状态。

3

Hb仪采样吸管一定要全部侵入液体中,避免气泡吸入,否则影响测定结果。

若“零点”漂移绝对值>2g/L,需调整“调零”旋钮,使仪

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