人尿道上皮细胞操作要点_技术交流_仪器仪表技术文献

人尿道上皮细胞操作要点

提供者：上海谷研实业有限公司发布时间：2022/10/20 16:30:54 阅读次数：3026次进入该公司店铺

商家名片

高**

请说明是阿仪网看到我的，谢谢!

公司:上海谷研实业有限公司
电话:02*******320
手机:18******584
微信:***
交换名片后展示联系方式

交换名片

人尿道上皮细胞操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内wan全解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

7)．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

8)．所使用的盖玻片应该为you质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；

9)．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

10)．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

11)．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

肺炎克雷伯氏菌催娩亚种 Klebsiella pneumoniae subsp. okatacy

嗜酸乳酸菌 Lactobacillus acidophilus

保加利亚乳杆菌 Lactobacillus bulgaricus