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细胞培养实验室设计规划

提供者:智立中特(武汉)生物科技有限公司   发布时间:2022/10/20 15:04:24  阅读次数:35次  进入该公司店铺

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 细胞培养室的规划
  细胞培养是一种无菌技术,要求工作环境和条件必须保,证无微生物和不受其他有害因素的影响。为防止微生物污染和有害因素的影响,细胞培养室要求环境清洁,空气清新、干燥、无尘。
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  细胞培养实验室由无菌操作区、孵育区、制备区、储藏区、清洗和消毒灭菌区6部分组成,这些区域的共同特点是房间要宽敞、明亮,地面要便于清洁、防滑,墙壁的质地光滑坚硬,仪器设备布局合理,方便操作,避免交叉干扰,陈设简洁,便于清扫。
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  无菌操作区
  无菌操作区是只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,,好能与外界隔离,不能穿行或受其他干扰。在一般环境的空气中,由于存在许多尘埃和杂菌,较易造成污染。
  因此,接种工作要在空气经过灭菌的环境里进行,小规模的无菌环境可利用超净工作台创造,大规模的需建无菌室。
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  理想的无菌操作室应划为三部分:
  a)更衣室―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
  b)缓冲间―位于更衣间与操作间之间,用于准备工作,还有防止污染的作用,以保,证操作间的无菌环境,同时可放置恒温培养箱以及必需的小型仪器。
  c)无菌操作间―无菌操作间则用于无菌操作、细胞培养,其大小要适当,且其顶部不宜过高以保,证紫外线的灭菌效果;墙壁光滑无死,角以便清洗和消毒,无菌操作间容积小且为密闭式,一般无菌操作间的空气消毒用紫外线灯,有的实验室使用无臭氧紫外线消毒器或电子消毒灭菌器。
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  净化工作台:操作简单,安装方便,占用空间小且净化效果很好。一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种:a)侧流式或称垂直式b)外流式或称水平层流式。
  孵育区
  孵育区也称培养区,本区对无菌的要求虽不比无菌区严格,但仍需清洁无尘,因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行,后者费用高,一般实验室多采用孵箱进行工作。
  制备区
  制备区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。应设有试剂柜、器械柜、实验台和上水道、电源等,配备的主要仪器设备有水纯化装置、天平、微波炉、pH计、抽气泵、电炉、培养分装器、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶等。
  在有天平、pH计、磁力拌器等设备下完成制备以后,应在无菌操作台进行过滤除菌。液体制备直接关系组织细胞养的成败,因此必须严格无菌操作。
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  储藏区
  储藏区主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等,此环境也需要清洁无尘。为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃。
  细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般为4℃下存放30min。转放-20℃1 h,再转入-80—-70℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃)。因此储存区必须配备冰箱、低温冰箱、超低温冰箱和液氮罐等设备。
  清洗和消毒灭菌区
  清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开,主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作,应备有高压蒸汽灭菌锅、细菌过滤设备、电热干燥箱、消毒柜、排风设备等。
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  细胞实验室的建设要求
  1、环境要求
  温度:仪器还是操作对温度没有特殊要求,维持舒适的温度即可,比如18~26度。
  湿度:过高的湿度会导致微生物的滋生,所以建议正常维持湿度在70%以下。
  洁净度:细胞实验对洁净区并没有要求,细胞实验里面只有细胞操作的时候要求无菌的环境,这时要求有局部的百,通常可以利用超净台或者生物安全柜来实现,不过有时候为了有个更好一点的环境,减小超净台过滤器更换的时间,会维持室内的洁净度,比如万的洁净度。
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  无菌无毒的操作环境和培养环境是保,证细胞在体外培养成功的要条件。细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100空气质量条件下进行。
  在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物质污染,或者自身代谢物质积累,可导致细胞中毒死亡。
  照明:满足实验用的操作照度,通常在300LUX。
  2、围护结构要求
  虽然实验的操作对大环境没有特殊要求,不过,好能有不产尘、不积尘的环境,能保,证室内的清洁,并且易于清洗、不容易滋生微生物,所以在选择维护结构时,选用彩钢板、医疗板等洁净板材是比较好的选择,为了保,证室内的通透性,可以布置密闭窗。
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  3、消毒
  通常做完实验后,都需要做终末消毒,室内需要安装紫外灯,利用紫外灯对空气和表面消毒。
  细胞实验室建设的注意事项
  1、放置细胞培养的实验室,空调需要能保,证在冬季能制冷,特别是在密闭的环境里,培养箱等设备的散热量会比较大,导致室内温度过高。
  2、如果设计成净化实验室,就需要按净化实验室的要求去做,如果做的细胞涉及到生物安全,则必须按照生物安全实验室去设计,具体根据所做实验的种类,来确定实验室的设计要求以及选择的设备,是选择超净工作台还是生物安全柜。
  3、从事临床细胞治疗的,需要按照具体的规范要求建设。

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