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PCR血液基因组DNA直提试剂盒

提供者:上海圻明生物科技有限公司   发布时间:2022/7/18 14:19:39  阅读次数:56次  进入该公司店铺

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PCR血液基因组DNA直提试剂盒是用于快速获得全血或冻存血液DNA的试剂盒,整个过程只需15min。使用该快提试剂盒获得的基因组DNA可直接用于下游PCR或定量PCR扩增。因其操作简单,时间短等优点,使得该试剂盒尤其适用于临床检测试验和高通量血液样品的PCR检测。
应用
SNP基因分型和突变检测
DNA测序和克隆
转基因动物的靶基因检测
储存
若短期使用请置于4℃可放置6个月;若保存请置于-20℃,避免反复冻融,可保存五年。
操作方法
1.哺乳动物无核红细胞全血
(1)实验操作请将10X红细胞裂解液用无菌水稀释到1X,如1ml的10X红细胞裂解液中加入9ml无菌水。
(2)在1.5ml EP管中加入600μl的1X红细胞裂解液,向红细胞裂解液中加入100μl抗凝全血,上下颠倒混合均匀,室温放置2min,13000rpm离心2min,倒掉上层红色液体,留取底部白细胞层。
(3)再次加入400μl的1X红细胞裂解液,上下颠倒5~10次。13000rpm离心1min,倒掉上层红色液体,留取底部白细胞层。
(4)通常底部残留40μl液体,漩涡震荡(或枪头吹打)重悬白细胞层,至无块状物。加入20μl DA Blood Solution,漩涡5s混合均匀。并置于75°C水浴中放置10min。孵育完毕后加入10μl DB Blood Solution,漩涡5s混合均匀,即可用于下游PCR扩增。通常每50μl PCR体系加入1μl制备的该基因组DNA即可。
2.禽类有核红细胞全血
(1)直接取2.5μl抗凝禽血加入到47.5μl水中,漩涡5s混合均匀。
(2)加入20μl DA Blood Solution,漩涡5s混合均匀。并置于75°C水浴中放置10min。孵育完毕后加入10μl DB Blood Solution,漩涡5s混合均匀,即可用于下游PCR扩增。通常每50μl PCR体系加入1μl制备的该基因组DNA即可。

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