大鼠纤连蛋白(FN)elisa试剂盒说明书代测、价格、厂家、说明书、用途等相关信息资料的说明,我们将为您免费提供。我司生产经营各种高质量国产ELISA试剂盒,现货供应、种类齐全、质量可靠、价格优惠。为您的实验提供优质的实验用品,是南京森贝伽公司的服务宗旨,如有需求,欢迎您来电咨询大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒说明书!大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒说明书产品资料
英文名称:Rat Fibronectin,FN ELISA Kit
产品货号:SBJ-R0766
品牌:森贝伽
产品规格:96T/48T
保存:2-8℃,避光保存
库存状态:现货供应
有效期:六个月
注:仅用于科研,不得用于临床诊断
大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒说明书储存方式
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
大鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒说明书注意事项
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。3.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
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关键词:人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)elisa试剂盒报价
试剂盒名称:人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA试剂盒
英文名称:Human Varicella zoster virus IgG,VZV-IgG ELISA Kit
试剂盒价格:联系哈灵QQ客服或来电询价!
试剂盒产地:进口/国产
储存方式:2-8℃
售后服务:技术老师全程提供ELISA实验指导以及免费代做实验。
人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA试剂盒报价哪里有卖(买)?价格怎么样?能否提供免费代测服务?
回答:上海哈灵生物ELISA试剂盒研究所 批发各种试剂,标准品,抗体,elisa试剂盒,实验室常规仪器,价格优惠, 货源充足,并且提供免费代测服务!如您有购买的意向或任何产品上的疑问,欢迎您的来电咨询,联系QQ客服或在我们的网站留言!
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规 格 (48T/96T)
样品类型 血清、血浆、细胞培养上清等样品类型
检测方法 酶联免疫法
特 异 性 公司elisa试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性
交叉反应 由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限,现有技术不可能完成药物检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此,交叉反应可能仍然存在
样 本 量 50-100 μL
实验时间 1–4.5h
储存条件 2-8°C
储存方法 可以存储在2 - 8°C长达1个月(专家建议:4°C恒温保存,酶免试剂盒实验效果更佳)。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密封铝箔袋,避免潮湿
有 效 期 6 months
工作原理人血管生成素1ELISA试剂盒的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
产品选型人血管生成素1ELISA试剂盒的类型 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:(1)固相的抗菌素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);(3)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的ELISA主要有以下几种类型:
双抗体夹心法测抗原
操作流程双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:1) 将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。在临床检验中,此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的异性抗体,就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清,包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体,一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗,分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性,而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应,作一步检测。 在一步法测定中,当标本中受检抗原的含量很高时,过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合,而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象,此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2,图1-4),如按常法测读,所得结果将低于实际的含量,这种现象被称为钩状效应(hook effect),因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时,反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,应注意可测范围的最高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。 假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇,例如HBsAg的a决定簇,也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。 双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的试剂,由于去除了Fc段,从而消除RF的干扰。双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响,已被列为这类试剂的一项考核指标。 双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。
安装要求人血管生成素1ELISA试剂盒样品要求
·客户需提供待检测抗体和包被用抗原。
·检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆。
·样本收集后应立即-20℃保存,若长期保存应-70℃。
·样本量的要求:若一个指标做复孔检测应不少于250ul,做单孔检测应不少于120ul。建 议若客户样本量充足最好提供500ul以上。
·客户的样本收集后,立即按要求保存,切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输。邮寄前请与技术支持沟通确认。
小鼠单克隆抗体Ig类/亚类鉴定ELISA试剂盒CL0150 现货供应,厂家直销付款方式:可以通过银行转帐,支付宝
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小鼠单克隆抗体Ig类/亚类鉴定ELISA试剂盒CL0150
人胎儿血红蛋白(HBF)elisa试剂盒 参数:
编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
F3421-A | 人胎儿血红蛋白(HBF)elisa试剂盒 | Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit | 48T |
编号 | 中文名称 | 英文名称 | 规格 |
F3421-A | 人胎儿血红蛋白(HBF)elisa试剂盒 | Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit | 48T |
人胎儿血红蛋白(HBF)elisa试剂盒 广泛应用在免疫学检验的各领域中,我们来介绍一下更简便的操作说明,编号:F3421-A,英文名称Human fetal hemoglobin,HBF elisa Kit
1、人胎儿血红蛋白(HBF)elisa试剂盒 操作方法一用于检测未知抗原的双抗体夹心法:(1).包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 (2).加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 (3).加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 (4).加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 (5).终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 (6).结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
2、人胎儿血红蛋白(HBF)elisa试剂盒 操作方法二:用于检测未知抗体的间接法: (1).用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 (2).加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)(3).于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。 (4).于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟 (5).于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml (6).可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素,以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测,既可以做定性试验也可以做定量分析等优点,已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。
3、临床标本的收集和保存 用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清(浆),有时因为特定的检测目的,也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集,要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4~6点之间,会有一峰值出现:生长激素、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式释放,因此,在测定此类激素时,有必要在密切相连的时间间隔内采取数份血样本,以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时,血清中肾素活性将出现明显增高。再如治疗药物的检测,应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响,只是在处理和保存方面要考虑。
(1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。(5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
4、试剂准备 在临床实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备最为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。其次,目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制,因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外,当试剂盒以OPD为底物时,则底物溶液应在反应显色前临时配制。
在现在的ELISA商品试剂盒中,血清样本的加入几乎是唯一的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
四、温育温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。温育这一步是临床ELISA测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1~2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题,就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间,在做HBsAg测定的室内质控中,测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时,总是测不出来,不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。因此,为保证37℃下足够的温育时间,临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
人elisa试剂盒产品详情如下:
ELISA试剂盒规格 | 48T | 96T | 保存 |
酶标包被板 | 1X48 | 1X96 | 4℃/-20℃ |
标准品 | 0.5ml X 1瓶 | 0.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
标准品稀释液 | 1.5ml X 1瓶 | 1.5ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
酶标试剂 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
样品稀释液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
显色剂A液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
显色剂B液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
终止液 | 3ml X 1瓶 | 3ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
25倍浓缩洗涤液 | 20ml X 1瓶 | 20ml X 1瓶 | 2℃-8℃ |
封板膜 | 2片 | 2片 |
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密封袋 | 1个 | 1个 |
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说明书 | 1份 | 1份 |
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人elisa试剂盒是用于测定血清,血浆及相关液体样本中总待测物质的含量。本试剂盒应用酶联免疫ELISA检测法测定标本中待测物质水平,用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入代测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下变成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色,颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
人ELISA试剂盒数值计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人ELISA试剂盒注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,底物请避光保存。
6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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