人胰蛋白酶原激活肽（TAP）ELISA试剂盒
产品名称：人胰蛋白酶原激活肽（TAP）ELISA试剂盒
价格：48T/96T保存温度：2-8℃价格：询价
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。 2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。 3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。 4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。 方法二 用于检测未知抗体的间接法： 用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。 ↓ 加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照） ↓ 于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml， 37℃孵育30-60分钟，洗涤,一遍用DDW洗涤。 ↓其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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试剂盒成份（2-8℃保存）
96孔配置
48孔配置
配制
96/48人份酶标板
1块板（96T）
半块板（48T）
即用型
塑料膜板盖
1块
半块
即用型
标准品：240ng/L
1瓶（0.6ml）
1瓶（0.3ml）
按说明书进行稀稀
空白对照
1瓶（1.0ml）
1瓶（0.5ml）
即用型
标准品稀释缓冲液
1瓶（6ml）
1瓶（3.0ml）
即用型
生物素标记的抗BA抗体
1瓶（6ml）
1瓶（3.0ml）
即用型
亲和链酶素-HRP
1瓶（6ml）
1瓶（3.0ml）
即用型
洗涤缓冲液
1瓶（20ml）
1瓶（20ml）
按说明书进行稀释
底物A
1瓶（6.0ml）
1瓶（3.0ml）
即用型
底物B
1瓶（6.0ml）
1瓶（3.0ml）
即用型
终止液
1瓶（6.0ml）
1瓶（3.0ml）
即用型
标本稀释液
1瓶（6.0ml）
1瓶（3.0ml）
即用型
人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒自备材料
1． 蒸馏水。
2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3． 振荡器及磁力搅拌器等。
人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒安全性
1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒操作注意事项
1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀释过后的标准品应丢弃，不可保存。
2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3． 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用，保质前使用。
4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液，使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆－－－－-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5、 保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒的准备
1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存，稀释前将标准品振荡混匀，稀释比例按说明书要求进行：
2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒操作步骤
1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5． 每孔加入50ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。
人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批间应分别小于9%和11%
人骨成型蛋白2(BMP-2)elisa试剂盒保存条件及有效期：
1.试剂盒保存：2-8℃。
2.有效期：6个月
3.产品运输：免费快递运输
问：人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒48T/96T分别可以检测多少个样本？
答：96T检测85个样本，剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔。
48T检测37个样本，剩余 的11个孔为高低浓度标准孔加1个空白对照孔
问：人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒售后服务是怎么样的？
答：武汉赛培生产的试剂盒，有专门的生物技术售后团队，实验中需要技术指导的话，可拨打公司技术专线，有一对一的咨询解答服务。
问：人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒代测寄样本有什么要求？答：单纯血清血浆，可以用泡沫盒子加冰袋快递运输，若冻存的样本，用干冰运输更好。
问：人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒样本保存期限多久？
答：2-8℃ ≤1周；-20℃ 1周＜t≤30天；-80℃ ＞30天。
问：人骨成型蛋白2(BMP-1)elisa试剂盒实验设置复孔有什么好处？
答：实验设复孔个人认为有以下几个优点：1.做细胞试验的随机性比较大，设多个复孔可以去处部分偏差大的数据减少检测的误差，2.设置多个复孔具有统计学意义，否则很难说明数据是偶然的还是真实的；3.设置复孔可以避免由于主观因素造成的误差；总的来说是为了，你得到的数据更接近与真实值，避免试验客观和主观误差。
问：武汉赛培生物生产的试剂盒与其它厂家的优势在哪里？
答：赛培生物的试剂盒变异系数小，试剂盒稳定性更高。批间和批内重复性偏差CV值都会控制在7%以下
武汉赛培生物，高品质ELISA试剂盒供应商，现货供应，厂家直销，品质卓越，价格实惠，售后完善，提供免费代测服务，含税含运费，（ELISA检测试剂盒价格）欢迎您来电索取。
武汉赛培生物科技有限公司 网站：www.spbio.cn
英文名称： MCP-3/CCL7 ELISA Kit
检测方法:酶联免疫吸附法简称:酶免法(ELISA)
产品规格： 96T/48T（12well*4strips/12well*8strips）
价 格： 电议
保存与运输： 冰袋运输，保存于2~8℃
使用范围：仅限科研使用，不能应用于临床
贮藏条件：2-8℃低温保存
待检样本：
体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
ELISA试剂盒检测范围：
人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
生产厂家：上海润裕生物科技有限公司
科研科研大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa试剂盒样品收集:
1. 血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
2. 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
5. 其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测
6. 样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。
7. 样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融。
8. 如果您的样品中检测物浓度高于标准品最高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释（建议先做预实验，以确定稀释倍数）。
科研大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa试剂盒所需自备物品:
1. 化学发光检测仪
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
4. 吸水纸
科研大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa试剂盒结果判断:
1.以标准品的浓度为横坐标，化学发光值为纵坐标，绘出标准曲线。亦可以化学发光值为横坐标，标准品的浓度为纵坐标，绘出标准曲线。
2.推荐使用专业的曲线制作软件，如curve expert 1.3或1.4，在软件界面既可根据样品化学发光值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；亦可将样品的化学发光值代入标准曲线的拟合方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
3.若样品化学发光值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。
英文名称：elisa试剂盒
规格：48T/96T
样品收集、处理及保存方法
1、 血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作注意事项:
1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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人白介素 ELISA试剂盒酶联免疫ELISA试剂盒注意事项：1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。 2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。 4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液、或辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。 5. 建议检测样品时均设双孔测定，以检测结果的性。本公司一直于食品安全与医疗诊断领域的研究开发，各种进口原装试剂盒，分装试剂盒，指标齐全，种属多，灵敏度高，其生产的兽药残留快速检测试剂盒主要有氯霉素、克伦特罗、莱克多巴胺、恩诺沙星、磺胺总量、链霉素、已烯雌酚、黄曲霉毒素、磺胺喹 啉、硝基呋喃类、贝类毒素等，详情电询。产品特点： 度高，灵敏度高，特异性强 检测时间短 操作简便 安全ELISA试剂盒价格产品说明及用途:尿样、组织、肝脏、饲料食品、饲料、尿样、粪便、组织、胆汁、血清、毛发、脉络膜/视网膜产品规格：48T/96T保存条件：2-8°c（注：本试剂只用于科研，欢迎来电咨询!） 上海研辉生物科技有限公司是国内主要供应商之一，公司代理了不同品牌价格档次的ELISA试剂盒。数万种抗体 耗材 试剂等, 品种多，质量好，灵敏度高，价格实惠，可免费提供代测服务（为您节省时间）更多产品请点击：www.shyhsw.com
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| BW00019B | 人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒 | Human XC-chemokine receptor 1,XCR1 ELISA Kit |
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| BW00022B | 人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒 | Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit |
| BW00023B | 人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒 | Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit |
| BW00024B | 人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 | Human Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit |
| BW00025B | 人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 | Human Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit |
| BW00026B | 人β细胞素(BTC) ELISA试剂盒 | Human beta cellulin,BTC ELISA Kit |
| BW00027B | 人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 | Human Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit |
| BW00028B | 人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒 | Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit |
| BW00029B | 人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)ELISA试剂盒 | Human insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit |
关于大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶elisa试剂盒和1,3-βD glucosidase试剂盒的更多详情欢迎来电垂询及索取实验说明书。产品名称：大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶（1,3-βD glucosidase）elisa试剂盒 英文名称：Rat 1,3-βD glucosidase ELISA Kit 货号：KB2705A规格：96T/48T保存条件：2-8℃，保存6个月。用途：用于定量或定性检测血清、血浆、组织液的液体样本，不能含有沉淀物。大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶elisa试剂盒，1,3-βD glucosidase试剂盒检测原理：本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶多克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶含量。大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶elisa试剂盒，1,3-βD glucosidase试剂盒类似产品： 兔肌钙蛋白Ⅰelisa试剂盒，Tn-Ⅰ试剂盒 人XC趋化因子受体1elisa试剂盒，XCR1试剂盒 人基质金属蛋白酶7elisa试剂盒，MMP-7试剂盒 兔肌钙蛋白Ⅰelisa试剂盒，Tn-Ⅰ试剂盒 人分泌型免疫球蛋白Aelisa试剂盒，SIgA试剂盒 人抗肾上腺皮质抗体elisa试剂盒，AAA试剂盒 黄曲霉毒素elisa试剂盒，Aflatoxin试剂盒 小鼠白介素-5elisa试剂盒，IL-5试剂盒 人胃泌素细胞抗体elisa试剂盒，GCA试剂盒 猪胰岛素样生长因子1elisa试剂盒，IGF-1试剂盒 人极低密度脂蛋白受体elisa试剂盒，VLDLR试剂盒 犬维生素K1elisa试剂盒，VK1试剂盒 大鼠中性粒细胞趋化蛋白2elisa试剂盒，NAP-2/CXCL7试剂盒 猪血管紧张素Ⅱelisa试剂盒，ANG-Ⅱ试剂盒 人血管生成素2elisa试剂盒，ANG-2试剂盒 人氢可的松elisa试剂盒，HYD试剂盒 小鼠水通道蛋白2elisa试剂盒，AQP-2试剂盒 大鼠肿瘤坏死因子αelisa试剂盒，TNF-α试剂盒 人激肽释放酶10elisa试剂盒，KLK 10试剂盒 人基质金属蛋白酶11elisa试剂盒，MMP11试剂盒 人抗Ku抗体elisa试剂盒 人醛缩酶elisa试剂盒 人ICE蛋白酶激活因子elisa试剂盒 人抗Ku抗体elisa试剂盒 人系统性红斑狼疮elisa试剂盒 小鼠载脂蛋白Helisa试剂盒 小鼠转化生长因子β2elisa试剂盒 大鼠卵清蛋白特异性IgEelisa试剂盒 人抗角蛋白抗体elisa试剂盒 人肝脂酶elisa试剂盒 大鼠前列腺素E1elisa试剂盒 小鼠β淀粉样蛋白1-42elisa试剂盒 小鼠β萘酚elisa试剂盒 小鼠血小板因子4elisa试剂盒 人基质金属蛋白酶2/明胶酶Aelisa试剂盒 人抗乙型肝炎病毒e抗体elisa试剂盒 大鼠水通道蛋白4elisa试剂盒 小鼠内毒素elisa试剂盒 人凋亡相关因子配体elisa试剂盒 人干细胞因子受体elisa试剂盒 关键词：大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶elisa试剂盒 1,3-βD glucosidase试剂盒
前沿简介：
IL12是一类多效性的细胞因子，其主要作用是激活自然死亡细胞和T淋巴细胞，促进初始T细胞的分化，适应性免疫细胞合成及辅助T淋巴细胞的分化与增殖。IL12是树突细胞、单核细胞、巨噬细胞受到细菌物质（如脂多糖、胞内病原体）刺激时产生的。临床试验证明，IL12与免疫介导的炎症反应疾病有关。
操作步骤：
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试 剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30ng/L，15ng/L）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算方法：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
仪器和材料
1. 聚苯乙烯微量细胞培养板（平板, 40, 96孔）。 2. 酶联免疫检测仪 3. 辣根过氧化物酶羊抗兔IgG, 工作稀释度1:1000。 4. 包被液:：0.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液,4℃，保存, Na2CO3 0.15克, NaHCO3 0.293克,蒸馏水稀释至100 ml。 5. 稀释液：0.01mol/LpH7.4 PBS－－Tween－－20, 4℃，保存. NaCl 8g, KH2PO4 0.2g, Na2HPO4.12H2O 2.9g, Tween—20，0.5ml. 蒸馏水加至1000ml。 6. 洗涤液：同稀释液 7. 封闭液：0.5%鸡卵清蛋白，pH7.4 PBS。 8. 邻苯二胺溶液（底物）：临用前配制 0.1M 柠檬酸（2.1g/100ml）, 6.1ml 0.2M Na2HPO4.12H2O （7.163g/100ml） 6.4ml, 蒸馏水12.5ml, 邻苯二胺10mg, 溶解后, 临用前加30%H2O2 40 微升。 9. 终止液：2mol/LH2SO4。
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