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组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过乙酰胆碱酯酶反应系统中释放出巯基胆碱,使用Ellman试剂后,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物,出现吸光峰值的变化,即采用比色法来测定细胞裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬液样品(动物、人体等)乙酰胆碱酯酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase;AchE;EC3.1.1.7),又称为红细胞胆碱酯酶(RBC cholinesterase),广泛存在于真核生物,包括某些植物,尤其在脑组织、神经肌肉连接处(neuromuscular junction)、中枢神经系统的胆碱能突触(cholinergic synapses)和红细胞膜上高度表达,催化主要的神经传导介质乙酰胆碱的水解反应,产生乙酸和胆碱,终止突触传导。其功能在于调节乙酰胆碱作用。神经毒气,例如有机磷沙林(Sarin),抑制乙酰胆碱酯酶活性,导致神经肌肉瘫痪,最终发生窒息(asphyxiation)。血清乙酰胆碱酯酶浓度显著降低与有机磷杀虫剂中毒有关,因此血液检测是环境污染的重要指标。基于人工合成底物碘化硫代乙酰胆碱(acetylthiocholine iodide)在乙酰胆碱酯酶的作用下,水解产生乙酸和硫代胆碱(thiocholine),与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析乙酰胆碱酯酶的活性。乙酰胆碱酯酶反应系统为:
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