大/小鼠淀粉样蛋白β（Aβ）（1-42）试剂盒
（日本IBL 27721）
简介
阿尔茨海默病(Alzheimer＇s disease)是由德国科学家Dr. A. Alzheime在1907年首次证实的.他的研究表明此类疾病是在老人人群引起痴呆的主要病因.在患有AD的人体中,老年斑的出现主要是由淀粉样蛋白β引起的.这类由40或42(43)个氨基酸组成的多肽,是由淀粉样前体蛋白(APP)中β分泌酶和γ分泌酶裂解形成的.APP是由695,751或770个氨基酸组成的跨膜蛋白.据报道,从APP cDNA感染的实验小鼠的成神经瘤细胞的上清液中发现有多种淀粉样蛋白β的变异体.而且,在1995年,Saido在老年斑内发现了一种类似淀粉样蛋白β多肽类的变异沉积物.Aβ(N3pE),这种变异分子第3个氨基残基(谷氨基)通过分子脱水转化成了焦谷氨酸.此试剂盒可检测大小鼠血液（血清或血浆）样本中Aβ42，由于它与人Aβ很难发生交叉反应，所以它可检测那些混有人Aβ的大小鼠Aβ42的样本
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的elisa试剂盒，使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂，最终溶液所显示的颜色强度与大鼠/小鼠样品中Aβ42的量成正比 检测范围
1.56~100pg/mL（0.35~22.6pmol/L，Aβ(1-42)分子量为4418）
预期用途
此试剂盒用于血清或EDTA-血浆中大鼠/小鼠Aβ42的定量检测
试剂盒组成
1. 微孔板，96T，包被有抗大鼠/小鼠Aβ(38-42)兔IgG
2. 标记抗体浓缩，30X，0.4ml，HRP标记的抗大鼠/小鼠Aβ(1-16)兔IgG Fab’
3. 标准品，0.5ml，2支，大鼠/小鼠Aβ(1-42)
4. EIA缓冲液，30ml
5. 标记抗体稀释液，12ml，1%的BSA，含0.05%的吐温20的PBS
6. 着色剂，TMB，15ml
7. 终止液，1N硫酸，12ml
8. 洗涤缓冲浓缩液，40X，50ml，0.005%吐温20的磷酸缓冲液
准备步骤
试验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪（450nm）
2. 移液器和枪头
3. 有刻度的烧杯和量筒
4. 蒸馏水
5. 冰箱（4℃）
6. 坐标纸（对数-对数）
7. 吸水纸
8. 标准品稀释管
9. 洗瓶
10. 一次性试验管
试剂准备
1. 洗涤缓冲液制备：先将洗涤浓缩液平衡至室温，充分混匀，然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀，即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内，并于2周内用完
2. 标记抗体的制备：用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍，即得。
例：如果只测一条板，8孔，则需要标记抗体800ul（30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液，混匀，使用时每孔加100ul）
此步骤在实验前完成
剩余的标记抗体浓缩应装于密封瓶内，保存在4℃
3. 标准品的制备：吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内，充分混匀，得到200pg/ml的大鼠/小鼠Aβ(1-42)标准品
4. 标准品的稀释：准备8个试管用于标准品的稀释，每管加入230ul的EIA缓冲液
第3年
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