大/小鼠可溶性淀粉样前体蛋白α(sAPPα)酶免试剂盒
(日本IBL 27415)
简介
首例阿尔茨海默病(AD)是由德国神经病理学家于1907年证实,认为是导致痴呆症的首要原因.众所周知,淀粉样蛋白β(老年斑的形成的主要组分)是由淀粉样前体蛋白(APP,共有三种亚型,APP695,APP751,APP770)经β分泌酶和γ分泌酶裂解形成的. sAPPβ经β分泌酶裂解形成相对应的淀粉样蛋白β,因此有望可以同时平行检测这两个物质.另一方面在APP的代谢途径中,APP通过α分泌酶而非β分泌酶裂解形成可溶性淀粉样前体蛋α (sAPPα) ,接着通过γ分泌酶裂解其残余的C末端而形P3. 近来研究报道,尝试着研究一种β分泌酶的抑制剂和γ分泌酶的激活剂用于AD治疗
依上所述,sAPPα和sAPPβ的检测在AD研究中是很有用的
此试剂盒可以用于检测大/小鼠样品中的sAPPα
注意:请注意样品的采集;因为此试剂盒还可检测全长APP
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,最终溶液所显示的颜色强度与大/小鼠中sAPPα的量成正比
检测范围
10~640pg/mL
预期用途
1. 此试剂盒用于血清,EDTA-血浆,细胞上清和脑提取物中大小鼠sAPPα的定量检测
2. 注意:由于此试剂盒也可检测全长APP分子,所以检测脑过程中应注意
3. 如果上清样品中含有胎牛血清(FCS),可能会发生交叉反应,建议设置一阴性质控
试剂盒组成
1. 微孔板,96T,包被有抗大/小鼠APP (597)兔IgG
2. 标记抗体浓缩,30X,0.4ml,HRP标记的抗大/小鼠APP (18)兔IgG Fab’
3. 标准品,0.5ml,2支,重组大/小鼠sAPPα蛋白
4. EIA缓冲液,30ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
5. 标记抗体稀释液,12ml,1%的BSA,含0.05%的吐温20的PBS
6. 着色剂,TMB,15ml
7. 终止液,1N硫酸,12ml
8. 洗涤缓冲浓缩液,40X,50ml,0.005%吐温20的磷酸缓冲液
准备步骤
试验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪(450nm)
2. 移液器和枪头
3. 有刻度的烧杯和量筒
4. 蒸馏水
5. 冰箱(4℃)
6. 坐标纸(对数-对数)
7. 吸水纸
8. 标准品稀释管
9. 洗瓶
10. 一次性试验管