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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

第16年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生化试剂 > 其他 > 上海瓦兰生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 淀粉去分支酶(DBE)试剂盒24T

淀粉去分支酶(DBE)试剂盒24T

价格:¥880

品牌名称:$brandModel.Title型号:24T原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/7 7:35:45

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高。涉及的品牌有原装/分装等不同价格档次的盒子,可以代检测(为您节省时间)具体价格请来电咨询。

支付方式:

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产品完善度: 访问次数:656

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详细内容

本试剂盒仅供科研使用


淀粉脱分支酶(Starch debranching enzyme,DBE)试剂盒说明书

(货号:WS0450F分光法24样)


一、产品简介:

淀粉去分支酶(DBE)(EC 3.2.1.68)属于淀粉水解酶家族,特异性地水解支链淀粉的

α-1,6糖苷键,产生线性的葡萄糖链,在调整支链淀粉分子的链长方面有重要的作用。

采用3,5-二硝基水杨酸法测定DBE催化支链淀粉产生的还原糖,通过测定还原糖

含量的变化来得到DBE酶活性大小。

二、试剂盒组分与配制

试剂名称

规格

保存要求

备注

提取液

液体30mL×1

瓶

4℃保存

试剂一

液体25mL×1

瓶

4℃保存

试剂二

粉剂mg×1瓶

4℃保存

临用甩几下,使试剂落入底部,再加

18mL试剂一,于80℃水浴锅中溶解呈透

明状态,待冷却后使用。

试剂三

液体25mL×1

瓶

4℃保存

试剂四

液体8mL×1瓶

4℃保存

标准品

粉剂mg×1支

4℃保存

若重新做标曲,则用到该试剂

三、所需的仪器和用品:

可见分光光光度计、1mL玻璃比色皿(光径1cm)、可调式移液器、水浴锅、台式离

心机、研钵、冰、蒸馏水

四、淀粉脱分支酶(DBE)活性检测:

建议正式实验选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备:

称取约0.1g组织,加入1mL提取液,进行冰浴匀浆。12000rpm,4℃离心10min,取

上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例进行提取

2、上机检测:

1

可见分光光光度计预热30min以上,调节波长到540 nm,蒸馏水调零。

2

在EP管中依次加入:

试剂名称(μL)

测定管

对照管

样本

30

30

(95℃煮沸10min的酶液)

试剂二

300

300

37℃孵育30min

试剂三

420

420

试剂四

150

150

混匀,95℃显色10min后,流水冷却至室温后,全部液体转移至1mL

玻璃比色皿中,于540nm处读取吸光值A,ΔA=A测定-A对照。

【注】若ΔA 差值较小,可加大样本量,或延长孵育时间至 1 小时或更长。本试剂盒仅供科研使用

2

则改变后的加样量 V1 或反应时间 T 需重新代入公式计算。

五、结果计算:

1、标准曲线:y=2.207x-0.0238,x是标准品质量(mg),y是ΔA。

2、按照蛋白浓度计算

酶活定义:每毫克组织蛋白每小时水解支链淀粉产生1mg还原糖(以麦芽糖计)定义为

一个酶活力单位。

DBE活力(mg/h/mg prot)=[ (ΔA+0.0238)÷2.207]÷(V1×Cpr)÷T

=30.21× (ΔA+0.0238) ÷Cpr

3、按样本鲜重计算

酶活定义:每克组织每小时水解支链淀粉产生1mg还原糖(以麦芽糖计)定义为一个酶

活力单位。

DBE活力(mg /h/g鲜重)=[ (ΔA+0.0238)÷2.207]÷(W×V1÷V)÷T

=30.21× (ΔA+0.0238) ÷W

V----加入提取液体积,1 mL;

V1----反应中样品体积,30μL=0.03mL;

W----样品质量,g;

T----反应时间,30min=0.5h;

Cpr---样本蛋白质浓度,mg/mL,建议使用本公司的BCA蛋白含量检测试剂盒;

附:标准曲线制作过程:

1制备标准品母液(50mg/mL):临用加1mL蒸馏水,充分溶解混匀。

2把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0,5,10,15,20, 25mg/mL。也可根据实际样本来

调整标准品浓度。

3按照测定管加样体系操作,依据结果即可制作标准曲线。

热门标签:淀粉去分支酶(DBE)试剂盒,DBE,ELISA

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