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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

第16年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > 其他 > 上海瓦兰生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 谷氨酰胺合成酶(GS)试剂盒48T

谷氨酰胺合成酶(GS)试剂盒48T

价格:¥570

品牌名称:$brandModel.Title型号:48T原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/7 7:37:42

产品摘要:谷胺酰胺合成酶(GS,EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,植物吸收
的无机氮经硝酸还原酶(NR)和亚硝酸还原酶(NIR)还原成 NH4+后,通过谷胺酰胺合成酶(GS)参
与的 GS/GOGAT 途径才能进行氮素的同化和利用。

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旗舰版网址:http://www.knbio.net

详细内容

本试剂盒仅供科研使用
1
谷胺酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书
(货号:WS1040F 分光法 48 样)
一、产品简介:
谷胺酰胺合成酶(GS,EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,植物吸收
的无机氮经硝酸还原酶(NR)和亚硝酸还原酶(NIR)还原成 NH4+后,通过谷胺酰胺合成酶(GS)参
与的 GS/GOGAT 途径才能进行氮素的同化和利用。
谷胺酰胺合成酶(GS)在 ATP 和 Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步
转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下形成的络合物在 540nm 处有大吸收峰,进而得到谷胺酰胺
合成酶(GS)的酶活性大小。
二、所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、
研钵、冰和蒸馏水。
三、试剂盒的组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
临用 37℃预热 10min,充分溶解
试剂二
液体 20mL×1 瓶
4℃保存
临用 37℃预热 10min,充分溶解
试剂三
粉剂 mg×1 瓶
-20℃保存
用甩几下或 4℃离心使试剂落入试管底部,再
加入 14mL 蒸馏水充分溶解待用,仍-20℃保存。
试剂四
液体 22mL×1 瓶
4℃保存
【注】粉剂量在 mg 别,使用用手甩几次或者进行离心,打开直接加入要求的试剂即可。
四、谷胺酰胺合成酶(GS)活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
① 组织样本:
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。12000rpm,4℃离心 10min,取
上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌/细胞到离心管内,离心后弃上清;取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液;
超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),
12000rpm,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例提取
2、 上机检测:
① 可见分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
② 在 EP 管中依次加入:
试剂(μL)
测定管
对照管
样本
200
200
试剂一
320
试剂二
320
试剂三
120
120]
本试剂盒仅供科研使用
2
混匀,37℃水浴 30min
试剂四
200
200
混匀,反应 2min,8000rpm,4℃离心 10min,全部上清液转
移至 1ml 玻璃比色皿中,于 540nm 处分别读取吸光值 A,
ΔA=A 测定-A 对照(每个测定管须设一个对应的对照管)。
【注】:若△A 值低于 0.01,可增加样本加样体积 V1(如由 200μL 增至 400μL,则试剂一和试剂
二相应减少 120μL,试剂三相应减少 80μL),保持反应总体积不变。或增加样本取样质
量 W(由 0.1g 增加到 0.2g 或更高)。则改变后的 V1 和 W 需代入公式重新计算。
五、结果计算:
1、按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每毫克组织蛋白在每分钟内使 A540 吸光值变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
GS(U/mg prot)=ΔA÷(Cpr×V1)÷0.01÷T=16.7×ΔA÷Cpr
2、按样本鲜重计算:
单位定义:每克组织在每分钟内使 A540 吸光值变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
GS(U/g 鲜重)=ΔA÷(W×V1÷V)÷0.01÷T=16.7×ΔA÷W
3、按细菌或细胞密度计算:
单位定义:每百万细菌或细胞在每分钟内使 A540 吸光值变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
GS(U/104 cell)=ΔA÷0.01÷(500×V1÷V)÷T=0.033×ΔA
V----加入提取液体积,1 mL;
V1----加入样本体积,0.2mL;
T----反应时间,30 min;
W----样本质量,g;
500----细胞数量;
Cpr----样本蛋白质浓度,mg/mL,建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。

热门标签:谷氨酰胺合成酶(GS)试剂盒

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