本试剂盒仅供科研使用
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土壤总酚含量测定试剂盒说明书
(货号: WS9430F 分光法 48 样 )
一、产品简介:
土壤中的酚类物质主要由植物释放,以及植物残体和凋落物分解产生。由于酚类物质的
难降解性,其在土壤中的积累会影响土壤的碳氮转化和温室气体排放,进而会使土壤肥力
衰退。另外,酚类物质对土壤有机质矿化和养分循环也有着重要影响。
本试剂盒采用福林酚法测定土壤中酚类物质含量,在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还
原,产生蓝色化合物,在 750nm 处有特征吸收峰,通过检测在 750nm 处的吸光值,进而
计算土壤中酚类物质含量。
二、所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、可调式移液器、天平、离心机。
三、试剂盒组分与配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 25mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂
四、土壤总酚含量的测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
称取约 0.5g 土壤样本,加入 1mL 提取液,室温振荡提取 30min。25℃×8000rpm,离
心 10min,取上清待测。
2、上机检测:
① 可见分光光度计预热 30min,调节波长至 750nm,蒸馏水调零。
② 在 1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)中依次加入:
试剂名称(µL)
测定管
空白管(仅做一次)
样本
180
蒸馏水
180
试剂一
450
450
试剂二
90
90
混匀,25℃室温静置 30min,全部液体转移至 1mL 玻璃
比色皿(光径 1cm)中,测定 750nm 吸光值 A,ΔA=A
测定-A 空白。
【注】:1.吸光值大于 1.2,上清液用蒸馏水适当稀释再测定,计算公式里乘以稀释倍数 D。
2.若ΔA 在零附近,可增加土壤取样质量 W,或加大样本上样量 V1(如增至 300µL,则
试剂一相应减少,保持总体积不变),则改变后 W 和 V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
1、标准曲线:y = 0.0712x - 0.0036,x 是标准品质量(µg),y 是ΔA。本试剂盒仅供科研使用
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2、土壤总酚含量(µg/g 土壤)=(ΔA+0.0036)÷0.0712÷(V1÷V×W)×D
=78.03×(ΔA+0.0036)×V÷W×D
V---加入提取液体积,1mL;
V1---反应中样品体积,0.18mL;
D---稀释倍数,未稀释即为 1;
W---土壤取样质量,g。
附:标准曲线制作过程:
1 制备标准品母液(10mg/mL):向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水,超声完全溶解。
2 把母液用蒸馏水稀释成五个浓度梯度的标准品:0, 0.02, 0.04, 0.06,0.08,0.1 mg/mL。
也可根据实际样本来调整标准品浓度。
3 依据测定管的加样体系操作,根据结果即可制作标准曲线。