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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

第16年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > 其他 > 上海瓦兰生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 土壤芳基酰胺酶活性测定试剂盒微板法48T

土壤芳基酰胺酶活性测定试剂盒微板法48T

价格:¥1070

品牌名称:$brandModel.Title型号:48T原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/7 7:37:42

产品摘要:土壤芳基酰胺酶(Aryl-acylamidase,EC 3.5.1.13)可水解带有酰胺基团的化合物;本
试剂盒利用土壤芳基酰胺酶水解底物 L-亮氨酸β-萘胺生成β-萘胺,β-萘胺接着与对二甲
氨基肉桂醛生成红色偶氮化合物,该化合物于 540nm 处有特征吸收峰,通过检测该红色
物质的增加速率,即可计算土壤芳基酰胺酶活性大小。

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详细内容

本试剂盒仅供科研使用
1
土壤芳基酰胺酶活性测定试剂盒说明书
(货号:WS4430W 微板法 48 样)
一、产品简介:
土壤芳基酰胺酶(Aryl-acylamidase,EC 3.5.1.13)可水解带有酰胺基团的化合物;本
试剂盒利用土壤芳基酰胺酶水解底物 L-亮氨酸β-萘胺生成β-萘胺,β-萘胺接着与对二甲
氨基肉桂醛生成红色偶氮化合物,该化合物于 540nm 处有特征吸收峰,通过检测该红色
物质的增加速率,即可计算土壤芳基酰胺酶活性大小。
二、试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体 30mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂 mg×1 瓶
4℃保存
临用甩几下使试剂落入底部,再加
入 12.5mL 蒸馏水,充分溶解备用,
试剂三
液体 8mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
粉剂 mg×1 瓶
4℃保存
临用甩几下使试剂落入底部,再加
入 10mL 乙醇,充分溶解备用。
标准品
粉剂 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、天平、离心机、恒温水浴锅、乙醇、可调式移液器。
四、土壤芳基酰胺酶活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
取新鲜土样风干或者 30℃烘箱风干,先粗研磨,过 40 目筛备用。
【注】:土壤风干,减少土壤中水分对于实验 s 的干扰;土壤过筛,保证取样的均匀细腻;
2、上机检测:
① 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm。
② 在 EP 管中依次加入:
试剂名称(μL)
测定管
对照管
样本
0.1g 土壤
0.1g 土壤
试剂一
300
300
试剂二
100
混匀,于 37℃孵育 2h(间隔 30min 振荡混匀一次)
95%乙醇
600
600
试剂二
100
立即混匀,于 12000rpm,室温或 4℃离心 10min,离心 10min,
上清液待测。本试剂盒仅供科研使用
2
③ 显色反应,在 96 孔板中依次加入:
上清液
80
80
试剂三
80
80
试剂四
80
80
混匀,10min 后,于 540nm 处测定吸光值 A,
△A=A 测定-A 对照(每个样本做一个自身对照)。
【注】:1.若△A 值在零附近徘徊,可在 37℃孵育阶段延长反应时间 T(如增至 3h 或更长),或增
加土壤样本量 W(如增至 0.2g),则改变后的反应时间 T 和 W 需代入公式重新计算。
2. 若 A 测定的值大于 1.8,可用乙醇对整个红色显色反应液进行稀释,则稀释倍数 D
需代入公式参与计算。
五、结果计算:
1、标准曲线方程:y = 0.0373x - 0.0017,x 是标准品浓度(μg/mL), y 是△A。
2、酶活定义:37℃条件下,每克土样每小时释放出 1μg 的β-萘胺为一个酶活力单位。
土壤芳基酰胺酶活性(μg/h/g 土样)=(△A+0.0017)÷0.0373×V1÷W÷T
=13.4×(△A+0.0017)÷W
V1---孵育阶段的反应总体积,1mL;
T---反应时间,2h;
W---样本质量,g;
附:标准曲线制作过程:
1 制备标准品母液(2.5mg/mL):标准品用 1mL 乙醇溶解。(母液需在两天内用)。
2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 5, 10, 15, 20, 25. μg/mL。也可根
据实际样本来调整标准品浓度。
3 依据显色反应阶段测定管的加样体系操作,根据结果即可制作标准曲线。

热门标签:土壤芳基酰胺酶活性测定试剂盒微板法

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