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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

第16年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生化试剂 > 其他 > 上海瓦兰生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒微板法96T

UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒微板法96T

价格:¥3950

品牌名称:$brandModel.Title型号:96T原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/7 7:37:42

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。
可以代检测(为您节省时间)
具体价格请lai电咨询

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产品完善度: 访问次数:533

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旗舰版网址:http://www.knbio.net

详细内容

本试剂盒仅供科研使用
尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-glucose pyrophosphosphprylase,UGP)试
剂盒说明书
(货号:WS5350W
微板法 96 样)
一、产品简介:
UDPG 焦磷酸化酶(UGP,EC 2.7.7.9)是碳水化合物代谢的重要指标之一,广泛
分布于自然界中,在微生物及动植物的许多组织中都有存在。催化葡萄糖活化,将 1-
磷酸葡萄糖与 UTP 分子合成为 UDP-葡萄糖(UDPG)。为各类碳水化合物包括蔗糖、
葡聚糖、纤维素、半纤维素、果胶质、糖蛋白等的合成提供葡萄糖基。
UGP 可逆催化反应生成 1 磷酸葡萄糖,在磷酸葡萄糖变位酶和 6-磷酸葡萄糖脱氢酶
作用下将 NADP 转化为 NADPH,340nm 的吸光值增加速率反映了 UGP 活性。
二、试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体120mL×1
瓶
4℃保存
试剂一
液体15mL×1瓶
4℃保存
试剂二
粉体×1支
-20℃保存
临用加1.1mL试剂一溶解,
仍-20℃保存。
试剂三
粉体mg×1瓶
4℃保存
临用加 5.4mL 去离子水溶解。
试剂四
粉体mg×1瓶
4℃保存
临用加 5.4mL 去离子水溶解。
三、所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、可调式移液器、天平、低温离心机、研钵、蒸馏水。
四、尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
① 组织样本:
称取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.2g),加 1mL 提取液,进行冰浴匀浆,
12000rpm,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:也可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取。
② 细胞样本:
取 500 万细胞加入 1mL 提取液;超声波破碎细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声
3s,间隔 10s,重复 30 次);12000rpm,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 1000~5000:1 的比例进行
提取
③ 液体样品:直接检测。若浑浊,离心后取上清检测。
2、上机检测:
① 酶标仪预热 30min,调节波长至 340nm,设定温度为 30℃。
② 在 96 孔板中依次加入:
试剂名称(μL)
测定管
样本
10
试剂一
80
试剂二
10本试剂盒仅供科研使用
2
【注】1. 若ΔA 差值在零附近徘徊,可以延长反应时间 20min 后读取 A2,则相应的
反应时间 T 则代入计算公式重新计算;
或者加大样本上样量(如:由 10μL 增加到 20μL,则试剂一相应减少,保持
总体积 200μL 不变),改变后的加样体积即 V1 代入计算公式重新计算;
或者由 0.1g 样本取样量增加到 0.2g,加 1mL 的提取液研磨提取。
2. 若上升趋势不稳定,可以每隔 10S 读取一次吸光值,选取一段线性
上升的时间段来参与计算,相对应的 A1 和 A2 值也代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
1、按照样本蛋白浓度计算
酶活定义:每毫克组织蛋白每分钟消耗 1 nmol 的 NADP 定义为一个酶活力单位。
UGP(nmol/min/mg prot)=[△A÷(ε×d)×V2×109]÷(V1×Cpr)÷T
=1607.8×△A÷Cpr
(2)按照样本质量计算
酶活定义:每克组织每分钟消耗 1 nmol 的 NADP 定义为一个酶活力单位。
UGP(nmol/min /g 鲜重)=[△A÷(ε×d)×V2×109]÷(W ×V1÷V)÷T
=1607.8×△A÷W
(3)按照细胞数量计算
酶活定义:每 104 个细胞每分钟消耗 1 nmol 的 NADP 定义为一个酶活力单位。
UGP(nmol/min /104 cell)= [△A÷(ε×d)×V2×109]÷(500×V1÷V) ÷T
=3.2×△A
(4)按照液体体积计算
酶活定义:每毫升液体每分钟消耗 1 nmol 的 NADP 定义为一个酶活力单位。
UGP(nmol/min /mL)=[△A÷(ε×d)×V2×109]÷V1÷T=1607.8×△A
ε---NADPH 摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;
V---加入提取液体积,1mL;
V1---加入样本体积,0.01mL;
V2---反应体系总体积,2×10-4 L;
d---96 孔板光径,0.5cm;
T---反应时间,4min;
500---细胞总数,500 万;
W---样本质量,g ;
Cpr---样本蛋白质浓度,mg/mL;建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
试剂三
50
轻轻混匀,30℃孵育 10min。
试剂四
50
轻轻混匀,反应开始,1min 时在 340nm 处读取吸光值 A1,
5min 时读取 A2,△A=A2-A1。

热门标签:UDPG焦磷酸化酶/尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶试剂盒

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