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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

第16年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生化试剂 > 其他 > 上海瓦兰生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > GABA转氨酶(GABA-T)试剂盒微板法48T

GABA转氨酶(GABA-T)试剂盒微板法48T

价格:¥1420

品牌名称:$brandModel.Title型号:48T原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/7 7:37:42

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。
可以代检测(为您节省时间)
具体价格请lai电咨询

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旗舰版网址:http://www.knbio.net

详细内容

本试剂盒仅供科研使用
γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)测定试剂盒说明书
(货号:WS3011W 微板法 48 样)
一、产品简介:
γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T,EC 2.6.1.96)是 GABA 支路中的关键酶之一,催化 GABA
的降解和转化。
本试剂盒利用γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)催化丙酮酸和 GABA 反应生成生成琥
珀酸半醛和丙氨酸,通过检测 GABA 的减少量进而得出 GABA-T 酶活力大小。
反应方程式:4-aminobutanoate + pyruvate = succinate semialdehyde + L-alanine
二、试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用甩几下使粉剂落入底部,
再加 3mL 试剂三溶解备用。
试剂二
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用甩几下使粉剂落入底部,
再加 4.5mL 试剂三溶解备用。
试剂三
液体 8mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
液体 11mL×1 瓶
4℃保存
试剂五
液体 10mL×1 瓶
4℃保存
试剂六
A:液体 8mL×3 瓶
B:液体 2mL×1 支
4℃保存
临用取0.55mL的B液进一瓶A
液中,混匀后作为试剂六使用。
混匀后的试剂六半个月内用完。
标准品
粉体 mg×1 支
4℃保存
若重新做标曲,则用到该试剂。
三、所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、水浴锅、离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
四、γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、 样本制备:
取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,冰浴匀浆,12000rpm,4℃离心 10min,取上清液待用。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
2、 上机检测:
① 酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 645nm。
② 所有试剂解冻至室温,在 EP 管依次加入:
试剂名称(μL)
测定管
对照管
样本
40
40
试剂一
40
蒸馏水
40
试剂二
40
40
混匀,于 30℃孵育 30min
试剂四
80
80
立即混匀,室温 12000rpm,离心 5min,上清液待测本试剂盒仅供科研使用
2
③ 显色反应:于 EP 管中依次加入:
上清液
50
50
试剂四
30
30
试剂五
100
100
试剂六
200
200
混匀,沸水浴(95-100℃)10min,冰浴至室温,呈现蓝绿色颜
色,若浑浊需 12000rpm 离心 5min,取澄清的 200μL 至 96 孔板
中,于 645nm 处读取各管的 A 值,△A=A 对照-A 测定(每个样本
需做一个自身对照)。
【注】若ΔA 值在零附近,可增加样本质量 W(如增至 0.2g),或延长 30℃孵育时间 T(如增至
1h 或更长),或加大样本量 V1(如增至 80μL,则试剂四相应减少),则改变后的 W 和 T 和
V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
1、标准曲线:y = 0.508x - 0.0003,x 为标准品质量(mg/mL),y 为吸光值ΔA。
2、按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每毫克组织蛋白每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T (mg/h/mg prot)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷(V1×Cpr)÷T=19.7×(ΔA+0.0003)÷Cpr
3、按样本鲜重计算:
单位定义:每克组织每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T (mg/h/g 鲜重)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷(W×V1÷V)÷T
=19.7×(ΔA+0.0003)÷W
4、按细菌/细胞数量计算:
单位定义:每 104个细胞每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活单位。
GABA-T (mg/h/104 cell)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷(500×V1÷V)÷T
=0.04×(ΔA+0.0003)
5、按照液体体积计算:
单位定义:每毫升液体每小时消耗 1mg 的 GABA 定义为一个酶活力单位。
GABA-T(mg/h/mL)=[(ΔA+0.0003)÷0.508]×V2÷V1÷T=19.7×(ΔA+0.0003)
V---提取液体积,1mL;
V1---加入反应体系中样本体积,0.04mL;
V2---反应体系总体积:0.2mL;
T---反应时间,30min=0.5h; W---样本质量,g;
Cpr---样本蛋白质浓度,mg/mL,建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
附:标准曲线制作过程:
1 标准品母液(2mg/ml):标准品临用加 1mL 蒸馏水溶解。
2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1, 1.2 mg/ml。也可根据实
际样本来调整标准品浓度。
3 按照显色反应阶段的测定管加样体系操作,根据结果即可制作标准曲线。

热门标签:GABA转氨酶(GABA-T)试剂盒

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