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4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)试剂盒48T
价格：￥2090
品牌名称：$brandModel.Title型号：48T原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/7 7:37:42
产品摘要：我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多，质量好，灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。
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详细内容
本试剂盒仅供科研使用
4-香豆酸：辅酶 A 连接酶（ 4-coumarate:CoA ligase，4CL)
试剂盒说明书
（货号：WS3001F 分光法 48 样）
一、产品简介：
4-香豆酸：辅酶 A 连接酶（4CL ，EC 6.2.1.12）是木质素生物合成的关键酶之一，位于
苯丙酸途径与木质素特异合成途径的转折点上，主要催化肉桂酸生成相应的肉桂酸辅酶 A
酯。该酶主要存在于高等植物、酵母和菌类中，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程
中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量而提高其品质提供依据。
4CL 催化 4-香豆酸和 CoA 生成 4-香豆酸 CoA，在 333nm 下测 4-香豆酸 CoA 生成速率，
即可反映 4CL 活性。
二、试剂盒组分与配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 28mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉剂×1 瓶
4℃保存
用甩几下使试剂落入底部，再加 5mL 蒸
馏水，于 80-100℃水浴 1-2 分钟溶解备用。
试剂三
粉剂×1 瓶
-20℃保存
用甩几下使试剂落入底部，再加 4.1mL
蒸馏水充分溶解备用。
三、所需的仪器和用品：
紫外分光光度计、1mL 石英比色皿（光径 1cm）、低温台式离心机、可调式移液器、
研钵、冰和蒸馏水。
四、4-香豆酸：辅酶 A 连接酶（ 4CL)活性测定：
1、样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织（水分充足的样本可取 0.5g），加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。
4℃×12000rpm 离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
② 细菌或培养细胞
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取
液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
4℃×12000rpm 离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照数量（104）：提取液体积(mL)为 500-1000：1 的比例进行提取
③ 液体样本：若是澄清液体，直接检测，若液体样本浑浊，需 4℃×12000rpm，离心
10min，取上清液检测。
2、 上机检测：
1 紫外分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 333nm，蒸馏水调零。
2 所有试剂至常温状态。
3 在 1mL 石英比色皿中依次加入：
试剂名称（μL）
测定管
样本
80
试剂一
560本试剂盒仅供科研使用
22
试剂二
80
试剂三
80
混匀，室温（25℃）下立即于 333nm 处读取吸
光值 A1，30min 后再读取 A2，△A=A2-A1。
【注】1. 若△A 在零附近徘徊，可加大样本量（如增至 160μL，则试剂一相应减少），或延长
反应时间 T，则改变后的样本体积 V1 和 T 需代入公式重新计算。
2. 若上升趋势不稳定，可每隔 2min 读取一次吸光值，选取一段线性上升时间段来参与
计算，相对应的 A 值也代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、按样本蛋白浓度计算：
酶活定义：每毫克组织蛋白每分钟使吸光值变化 0.005 所需的酶量定义为一个酶活力单位。
4CL(U/mg prot)=ΔA÷(V1×Cpr)÷0.005÷T=83.3×ΔA÷Cpr
2、按样本鲜重计算：
酶活定义：每克组织每分钟使吸光值变化 0.005 所需的酶量定义为一个酶活力单位。
4CL(U/g 鲜重)=ΔA÷(W×V1÷V)÷0.005÷T=83.3×ΔA÷W
3、按细菌或细胞密度计算：
酶活定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟使吸光值变化 0.005 所需的酶量定义为一个酶活单位。
4CL(U/104 cell)=ΔA÷(500×V1÷V)÷0.005÷T=0.17×ΔA
4、按液体体积计算：
酶活定义：每毫升液体每分钟使吸光值变化 0.005 所需的酶量定义为一个酶活单位。
4CL(U/mL)=ΔA÷V1÷0.005÷T=83.3×ΔA
V－－-加入提取液体积，1 mL；
V1－－-加入样本体积，0.08 mL；
T－－-反应时间，30min；
W－－-样本质量，g；
500－－-细菌或细胞总数，500 万。
Cpr－－-样本蛋白质浓度，mg/mL；建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
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