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上海瓦兰生物科技有限公司 主营产品:实验仪器,消耗品,分子生化试剂,免疫试剂和细胞培养试剂

第16年

当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生化试剂 > 其他 > 上海瓦兰生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 脯氨酸脱氢酶(ProDH)试剂盒48T

脯氨酸脱氢酶(ProDH)试剂盒48T

价格:¥490

品牌名称:$brandModel.Title型号:48T原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/7 7:37:42

产品摘要:我公司所销售的ELISA试剂盒,品种多,质量好,灵敏度高,涉及的品牌有美国原装/分装等不同价格档次的盒子。
可以代检测(为您节省时间)
具体价格请lai电咨询

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产品完善度: 访问次数:557

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详细内容

本试剂盒仅供科研使用
脯氨酸脱氢酶(PDH)试剂盒说明书
(货号:WS1011F 紫外法 48 样)
一、产品简介:
脯氨酸脱氢酶(proline dehydragenase,PDH,EC 1.5.1.2) 催化脯氨酸生成 Δ1-二氢吡咯-
5-羧酸的反应,是脯氨酸降解过程的限速步骤。脯氨酸是分布广泛的一种渗透物质,在胁
迫条件下很多植物可以通过增加合成、减少降解而在体内累积大量脯氨酸,降低 PDH 活性
对于防止渗透胁迫对植物造成伤害、保护细胞结构等方面具有重要意义。
脯氨酸脱氢酶(PDH)催化脯氨酸脱氢并使 NAD+还原成 NADH,通过检测 NADH 在340nm
处的增加速率即可得出 PDH 酶活性大小。
二、试剂盒的组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用甩几下,使粉体落到底部,
再加入 1.1mL 蒸馏水溶解备用
试剂二
液体 30mL×1 瓶
4℃保存
试剂三
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用甩几下,使粉体落到底部,
再加入 1.1mL 蒸馏水溶解备用
三、所需的仪器和用品:
紫外分光光度计、1mL 石英比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵、
冰和蒸馏水。
四、脯氨酸脱氢酶(PDH)活性测定:
建议正式实验选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备:
称取约 0.1g 组织样本,加入 1mL 提取液,冰浴匀浆,12000rpm,4℃离心 10min,
取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取。
2、上机检测:
① 紫外分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
② 所有试剂解冻至室温(25℃)。
③ 在 1mL 石英比色皿(光径 1cm)中依次加入:
试剂名称(μL)
测定管
样本
120
试剂一
20
试剂二
560
试剂三
20
轻轻混匀,室温(25℃)下,可先孵育 6min 后于
340nm 处读取 A1,30min 后读取 A2,△A=A2-A1。
【注】 1.若△A 的值在零附近,可以适当延长反应时间 T 到 60min 后或更长读取 A2,改变后的
反应时间需代入计算公式重新计算。或适当增加样本取样质量 W,则改变后的反应时
间 T 和样本质量 W 需代入计算公式重新计算。本试剂盒仅供科研使用
2
2. 若起始值 A1 太大如超过 2(如颜色较深的植物叶片,一般色素较高,则起始值相对
会偏高),可以适当减少样本加样量 V1(如减至 80μL,则试剂三相应增加),则改变
后的加样体积 V1 需代入计算公式重新计算。
或向待测样本中加少许活性炭混匀静置 5min 后 12000rpm, 4℃离心 10min,上清液用于检测;
3.若上升趋势不稳定,可以每隔 2min 读取一次吸光值,选取一段线性下降的时间段 T 参与
计算,相对应的 A 值也代入计算公式重新计算。
五、结果计算:
1、按样本蛋白浓度计算
单位定义:每毫克组织蛋白在每分钟内生成 1 nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
PDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(V1×Cpr) ÷T=32.2×ΔA÷Cpr
2、按样本鲜重计算
单位定义:每克组织在每分钟内生成 1nmol NADH 定义为一个酶活力单位。
PDH(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(W× V1÷V) ÷T=32.2×ΔA÷W
V---加入提取液体积,1 mL;
V1---加入样本体积,0.12mL;
V2---反应体系总体积,7.2×10-4 L;
d---光径,1cm;
ε---NADH 摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;
W---样本质量,g;
T---反应时间,30min;
Cpr---蛋白浓度(mg/mL),建议使用本公司的 BCA 蛋白含量测定试剂盒。

热门标签:脯氨酸脱氢酶(ProDH)试剂盒

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