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淀粉磷酸化酶(SP)测试盒(分光光度法)100管/96样
价格:¥电议
品牌名称:$brandModel.Title型号:100管/96样原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/16 11:23:53
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详细内容
淀粉磷酸化酶(Starch phosphorylase,SP)试剂盒说明书
规格:100管/96样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代谢过程唯一的可逆反应酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于质体中,负责延长淀粉的 α-1,4- 葡萄糖链的非还原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于细胞质基质中,催化淀粉中的 α-1,4-糖苷键磷酸解产生葡萄糖-1-磷酸,负责葡萄糖链的磷酸解,是淀粉代谢过程中的关键酶。
在植物体中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物无机磷浓度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸浓度几乎高了两个数量级,一般认为淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要测定意义。
测定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的 α-1,4-糖苷键与无机磷反应产生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖变位酶的作用下产生葡萄糖-6-磷酸,并在 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下还原NADP+产生 NADPH,使 340nm 下吸光值增加。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前加入 3mL 水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存; 试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存;临用前加入 3mL 水溶解,用不完的试剂分装后-20℃保存。样本的前处理:
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃,离心 10min,取上清待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议
500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零;
2、 工作液的配制:临用前将试剂一、试剂二、试剂三按照每个样本 850µL:50µL:50µL 的比例混合,临用前配制,半小时内使用。
3、 在 1mL 石英比色皿中加入 50µL 样本和 950µL 工作液,立即混匀,记录 340nm 处 1min
时的吸光值 A1 和 6min 时的吸光值A2,计算 ΔA=A2-A1。
热门标签:淀粉磷酸化酶(SP)测试盒(分光光度法)













