产品介绍

AF 700 PHA-E是将从菜豆（Phaseolus vulgaris）种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E，与Alexa Fluor 700荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性近红外一区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性，对该类特殊糖链修饰具有的选择性，同时依托Alexa Fluor 700染料经过大量科研验证的成熟近红外光谱特性，兼具低背景与的多通道兼容性，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统可见光区标记凝集素在多色成像中通道串扰大、深层样本信号弱的痛点。试剂为深蓝色至蓝紫色冻干粉，在中性水性介质中溶解分散性良好，是近红外一区开展菜豆凝集素靶向糖链多色共定位研究的特色专用工具。

基础参数

中文名称：AF700标记菜豆凝集素E，AF700-外源凝集素(菜豆)

英文名称：AF 700 PHA-E，Alexa Fluor700-PHA-E，Alexa Fluor700-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态：深蓝色至蓝紫色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发峰位约为696 nm，发射峰位约为719 nm，属于近红外一区低自发荧光窗口

储存条件：-20℃避光干燥密封存放，避免反复冻融，分装后使用可延长试剂有效期，操作时全程减少强光直射，防止染料发生光漂白导致荧光性能下降

用途：β-1,6-分支N-连接寡糖近红外一区低背景荧光标记，多色成像远红通道搭建，近红外光谱传感分析

作用机理

AF 700 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 700荧光基团通过稳定酰胺键与PHA-E蛋白表面的赖氨酸残基偶联，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联后PHA-E识别GalNAc糖链的结合活性基本保留，Kd值与未标记凝集素偏差在可接受范围内，不会因标记引入大的亲和力偏移。在696nm波长激发下，偶联在蛋白上的Alexa Fluor 700基团可发射出明亮的719nm近红外荧光，该波段与488 nm、568 nm常用染料光谱区分度高，自荧光背景噪声低，直接将凝集素的糖链识别事件转化为低串扰的特征荧光信号。

核心产品优势

AF 700 PHA-E的核心差异化优势集中在近红外一区的低串扰高兼容综合表现上，相比传统可见光区标记的同类凝集素，Alexa Fluor 700染料的发射波长进入近红外低自发荧光窗口，生物样本内源性背景噪声极低，做双通道或多色共标记时通道串扰明显小于可见光染料体系，成像信噪比大幅提升。试剂经过严格的游离染料去除工艺，游离染料残留低于2%，非特异性吸附极低，同时其光谱轮廓锐利，与AF488、AF568等常用荧光通道几乎无信号重叠，无需复杂光谱补偿即可搭建高独立性的多色成像体系，是近红外一区开展β-1,6-分支N-连接寡糖多色共定位研究的特色专用标杆工具。

应用领域

AF 700 PHA-E可用于免疫荧光成像，作为糖链探针标记表达GalNAc或唾液酸的细胞表面糖蛋白，配合共聚焦显微镜观察亚细胞区室定位，也可用于固定组织切片的糖谱染色。该试剂可应用于流式细胞术分析，与表面抗体组合检测特定细胞亚群糖链表达差异，或者用于糖链竞争阻断实验，验证凝集素结合的特异性。同时它也适用于非医疗领域的方法学研究，在环境检测中作为糖识别元件用于水体中特定糖蛋白或糖基化污染物的荧光示踪，辅助建立基于凝集素亲和作用的检测方法，在化学传感领域集成于光学传感膜或光纤传感平台，用于对糖类分析物响应信号的构建与验证，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的特色工具。

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