产品介绍

AF 680 PHA-E是将从菜豆（Phaseolus vulgaris）种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E，与Alexa Fluor 680荧光染料通过成熟的共价偶联工艺制备而成的糖链特异性近红外一区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性，对该类特殊糖链修饰具有的选择性，同时依托Alexa Fluor 680磺化花青类荧光骨架，兼具超高水溶性与极强抗光漂白能力，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统可见光区标记凝集素在厚样本成像中背景噪声高、穿透深度不足的痛点。试剂为深蓝紫色至近黑色冻干粉，在中性生理缓冲液中溶解分散性，几乎无染料聚集现象，是近红外一区开展菜豆凝集素靶向糖链深层组织成像研究的标杆级专用工具。

基础参数

中文名称：AF680标记菜豆凝集素E，AF680-外源凝集素(菜豆)

英文名称：AF 680 PHA-E，Alexa Fluor680-PHA-E，Alexa Fluor680-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态：深蓝紫色至近黑色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发波长约679 nm，发射波长约702 nm，属于近红外一区低自发荧光窗口

储存条件：-20℃避光密封干燥长期保存，复溶后建议4℃避光短期存放

用途：β-1,6-分支N-连接寡糖近红外一区低背景荧光标记，厚组织深层成像，近红外Western blot荧光检测

作用机理

AF 680 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 680荧光基团通过酰胺键锚定在PHA-E亚基表面，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在680nm波长激发下，偶联在蛋白上的Alexa Fluor 680基团可发射出明亮的702nm近红外荧光，该波段处于生物样本自发荧光几乎完全消失的近红外窗口，光在生物组织中的散射损耗极低，直接将凝集素的糖链识别事件转化为超高信噪比的深层成像荧光信号。

核心产品优势

AF 680 PHA-E的核心差异化优势集中在近红外一区的极低背景高穿透综合表现上，相比传统可见光区标记的同类凝集素，Alexa Fluor 680染料的发射波长进入近红外一区低自发荧光窗口，生物样本内源性背景噪声几乎完全消除，成像信噪比相比绿光标记凝集素提升数倍，同时长波长光子在生物组织中的穿透深度显著增加，可实现厚组织样本数百微米深度的清晰成像。试剂经过严格的游离染料去除工艺，游离染料残留低于1%，非特异性吸附极低，同时其光稳定性远优于传统普通花菁类近红外染料，长时间连续激光扫描下信号几乎无明显衰减，完全支持大体积样本的多层层扫成像，是近红外一区开展β-1,6-分支N-连接寡糖厚组织成像研究的标杆级专用工具。

应用领域

AF 680 PHA-E可用于糖链分选与荧光检测，依托其近红外低背景特性，在微流控芯片分析体系中实现靶标糖链的高灵敏度定量检测。该试剂可应用于组织切片荧光染色，用于生物组织切片中糖蛋白分布的空间可视化，与其他不同波段的荧光标记抗体联合使用进行多重检测，获得多靶标的空间分布信息。同时它也适用于近红外Western blot荧光检测，特异性标记细胞裂解液中的GalNAc修饰蛋白，配合SDS-PAGE分离后使用近红外扫描仪检测，获得低背景的清晰条带信号，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的标杆级工具。

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