产品介绍

AF 488 PHA-E是将从菜豆（Phaseolus vulgaris）种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E，与Alexa Fluor 488荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性经典绿色区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性，对该类特殊糖链修饰具有的选择性，同时依托Alexa Fluor 488染料行业公认的标杆级荧光性能，兼具超高量子产率与极强抗光漂白能力，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统FITC标记PHA-E光稳定性不足、长时间成像信号快速淬灭的痛点。试剂为亮绿色至黄绿色冻干粉，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是绿色区开展菜豆凝集素靶向糖链研究的标杆级通用工具。

基础参数

中文名称：AF488标记菜豆凝集素E，AF488-外源凝集素(菜豆)

英文名称：AF 488 PHA-E，Alexa Fluor488-PHA-E，Alexa Fluor488-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态：亮绿色至黄绿色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发波长约495 nm，发射波长约519 nm，荧光量子产率约0.92（PBS, pH 7.4, 25℃）

储存条件：-20℃避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后建议2-8℃避光短期储存

用途：β-1,6-分支N-连接寡糖经典绿色区荧光标记，共聚焦长时间层扫成像，流式细胞术高灵敏度检测

作用机理

AF 488 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 488荧光基团通过NHS活性酯与PHA-E蛋白表面赖氨酸残基的氨基反应形成稳定酰胺键，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在488nm标准激光线激发下，偶联在蛋白上的Alexa Fluor 488基团可发射出明亮的519nm绿色荧光，该波段完全适配所有常规荧光显微镜、共聚焦显微镜与流式细胞仪标配的FITC/GFP通道，直接将凝集素的糖链识别事件转化为超高亮度的特征荧光信号，无需任何仪器参数调整，一步孵育即可完成靶标糖链的高灵敏度原位标记。

应用领域

AF 488 PHA-E可用于细胞表面糖基化定量分析，依托其高亮度与低背景特性，通过流式细胞术定量不同细胞群体的β-1,6-分支N-连接寡糖表达水平差异。该试剂可应用于组织切片精细糖谱定位，对大组织冷冻切片进行共聚焦多层层扫成像，清晰呈现组织内部不同区域的靶标糖链空间分布模式。同时它也适用于活细胞糖链动态追踪，依托其的抗光漂白性能，在长时间活细胞成像系统中连续观察数小时，追踪细胞迁移过程中细胞膜表面靶标糖链的动态重分布过程，为糖生物学相关非医疗方向研究提供稳定可靠的标杆级工具。

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