产品介绍

AF 546 PHA-E是将从菜豆（Phaseolus vulgaris）种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E，与Alexa Fluor 546荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性橙红区标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对β-1,6-分支N-连接寡糖结构的高亲和力识别特性，对该类特殊糖链修饰具有的选择性，同时依托Alexa Fluor 546染料经过大量科研验证的经典光谱特性，兼具高亮度与极低的多色通道串扰表现，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统TRITC标记PHA-E光谱拖尾严重、多色成像通道串扰大的痛点。试剂为深红色至紫红色冻干粉，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是橙红区开展菜豆凝集素靶向糖链多色成像研究的经典标杆工具。

基础参数

中文名称：AF546标记菜豆凝集素E，AF546-外源凝集素(菜豆)

英文名称：AF 546 PHA-E，Alexa Fluor546-PHA-E，Alexa Fluor546-Phaseolus vulgaris lectin E

外观状态：深红色至紫红色冻干粉

荧光光谱参数：最大激发波长约546 nm，发射波长约573 nm，荧光量子产率约0.79（PBS, pH 7.4, 25℃）

储存条件：-20℃避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后建议2-8℃避光短期储存

用途：β-1,6-分支N-连接寡糖橙红区荧光标记，多色成像低串扰通道搭建，常规荧光显微与流式分析

作用机理

AF 546 PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中带有β-1,6-分支结构的N-连接寡糖链，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。Alexa Fluor 546荧光基团通过NHS活性酯与PHA-E蛋白表面赖氨酸残基的氨基反应形成稳定酰胺键，标记位点远离蛋白核心糖结合口袋，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在546nm波长激发下，偶联在蛋白上的Alexa Fluor 546基团可发射出明亮的573nm橙红色荧光，该波段完美适配所有常规实验室标配的TRITC滤光片组，且光谱轮廓锐利，长波拖尾极少，直接将凝集素的糖链识别事件转化为低串扰的特征荧光信号，无需复杂的光谱拆分操作，一步孵育即可完成靶标糖链的原位标记。由陕西 新.研.博.美 生物科技小编木木整理

核心产品优势

AF 546 PHA-E的核心差异化优势集中在橙红区的经典低串扰综合表现上，相比传统TRITC标记的PHA-E，Alexa Fluor 546染料的光谱分布更窄，长波方向无明显拖尾，与FITC、Cy5等相邻通道的信号重叠度远低于TRITC，多色成像时通道串扰大幅降低，无需复杂的光谱补偿即可获得清晰的多通道成像结果。试剂经过严格的游离染料去除工艺，游离染料残留低于1%，非特异性吸附极低，同时其光稳定性显著优于传统罗丹明类染料，长时间连续成像下信号衰减速率慢，完全支持常规共聚焦显微镜的多通道层扫成像，是橙红区开展β-1,6-分支N-连接寡糖多色成像研究的经典标杆工具。

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