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BL21(DE3)pLysS 感受态细胞
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:37
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详细内容
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| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| BL21(DE3)pLysS 感受态细胞 | BL21(DE3)pLysS Competent Cells | 5×100μl|10×100μl |
概述
BL21(DE3)pLysS感受态细胞是BL21(DE3)pLysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。
特点
该菌株带有质粒pLysS，具有氯霉素抗性。此质粒含有表达T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达。该菌株适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达
应用
该菌株适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
使用说明
1.-80℃冰箱内取出E.coli BL21(DE3)pLysS Competent Cells，迅速插入冰盒内，使其溶解。2.加入DNA样品轻轻混匀，冰中放置30分钟。3.42℃水浴热激45，迅速放回冰中放置2分钟，注意不要晃动。添加700μl不含抗生素的无菌培养基，混合均匀。4.37℃振荡培养1小时(160-225rpm)，吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37℃正置至液体被吸收，然后倒置过夜培养。
异水飞蓟宾(分析标准品,≥98%)质量规格：分析标准品,≥98%Isosilybin RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISA试剂盒兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 人抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒 ，英文名： pANCA ELISA Kit
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二甲亚砜-d6 99.9原子%D(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC)Dimethyl Sulfoxide-d6 99.9atom%D 大鼠流行性出血热IgG抗体试剂盒 Rat epidemic hemorrhagic fever IgG aibody ELISA kit Humanheparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor,HB-EGFELISAKit人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISA试剂盒大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T 106577-39-3HederacolchisideA1厂家 Hederacolchiside A1
小鼠载脂蛋白F(APOF)ELISA试剂盒 ，英文名： APOF ELISA Kit 17233-22-6黄花败酱苷C说明书 Scabioside C
猴E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA检测试剂盒MonkeyE-SelectinELISAkit 96T/48T 129724-84-1白头翁皂苷A3品牌 Pulchinenoside A3
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英文名称HumanSerumamyloidAELISAKit人血清淀粉样蛋白A(SAA)规格：96T/48T 64657-21-2异佛司可林厂家 Isoforskolin
BL21(DE3)pLysS 感受态细胞19130-96-2脱氧野尻霉素厂家 1-Deoxynojirimycin 英文名称RatMethylaseELISAKit大鼠甲基化酶(Methylase)规格：96T/48T
19121-58-5澳洲茄碱规格 Solasonine 英文名称RatMethylaseELISAKit大鼠甲基化酶(Methylase)规格：96T/48T
19083-00-2纤细薯蓣皂苷说明书 Gracillin 英文名称RatMD2ELISAKit大鼠髓样分化蛋白-2(MD2)规格：96T/48T
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产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
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