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pUC18载体
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详细内容
pUC18/19 是一种常用克隆载体,由pBR322 改造而来,含有抗氨苄青霉素基因、LacZ 基因及与M13mp18相同的多克隆位点。这两个质粒的结构几乎是完全一样的,只是多克隆位点的排列方向相反。重组pUC18/19的克隆转化细胞可用蓝/白斑法筛选。本产品为高纯度质粒,溶于TE缓冲液,可直接用于PCR、酶切等分子克隆操作。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| pUC18载体 | pUC18 plasmid | 20ug |

宿主菌:建议用E.coli DH5α、JM109 及XL1-Blue 做受体菌。
储存条件:-20℃
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Decyl alcohol质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 小鼠ELISA试剂盒 血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒 ,英文名: TXB2 ELISA Kit
琥珀(standard for GC,≥99.6%(GC))Diethyl succinate质量规格:standard for GC,≥99.6%(GC) 小鼠动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒 ,英文名: PK2 ELISA Kit MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA试剂盒小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
癸二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Diethyl sebacate质量规格:Standard for GC, ≥99.5% (GC) 人维生素D2(VD2)ELISA检测试剂盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T ELISAKitS-100小鼠S100蛋白规格:48T/96T
二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))Docosane质量规格:standard for GC,≥99.0%(GC) 大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)试剂盒 Rat Iegrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISAKit鸡弓形虫循环抗原(TCA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA检测试剂盒Mousecatecholamine,CAELISAKit 96T/48T 57420-46-9胡麻属苷品牌 Sesamoside
人抗α-胞衬蛋白抗体(IgG)试剂盒 Human ai-alpha-Fodrin aibody IgG ELISA Kit 98243-57-3湖贝甲素规格 Hupehenine
RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒规格:96T/48T 535-83-1葫芦巴碱厂家 Trigonelline
载玻片细胞GSK-3BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 1370264-16-6拟人参皂苷-Rh2说明书 3-O-β-D-glucopyranosyl-3β,12β,25-trihydroxyldammar-(E)-20(22)-ene
Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA试剂盒人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格:96T/48T 6199-67-3葫芦素B品牌 Cucurbitacin B
pUC18载体59-30-3叶酸说明书 Folic acid 猪早老素2(PS-2)试剂盒 Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit
59219-65⁻⁷豯莶苷品牌 Darutoside 猪早老素1(PS-1)试剂盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit
590-46-5盐酸甜菜碱说明书 Betaine 猪载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒 Pig apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
58812-37-6川楝素规格 Toosendanin 猪载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒 Porcine apo-B100 ELISA Kit
58749-23-8甘草查尔酮B规格 Licochalcone B 猪载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA检测试剂盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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