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详细内容
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解全血(液体样本)和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, 后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 血液miRNA提取试剂盒 | Blood microRNA Extraction Kit | 50次 |
近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15?-30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA,对于血液样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。

产品组分:
Lysis buffer———————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.独特的裂解液配方,可直接裂解全血,不需要先裂解去除红细胞。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
注意事项:
1. 次使用请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,,一次性注射器,研钵。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
肠毒素B(SEB)单重荧光PCR检测试剂盒4817-Acetyloxy-chloroα-chloromethylpregna,6-diene,-dione171838醋酸环丙氯地孕酮
A组链球菌单重荧光PCR检测试剂盒4817-Hydroxya,2a-methylenepregna,6-diene,-dione acetate2
流感嗜血杆菌单重荧光PCR检测试剂盒484-(Phenylthio)benzyl alcohol63176
肺炎链球菌单重荧光PCR检测试剂盒48Fenticonazole nitrate731519硝酸芬替康唑
嗜肺军团菌单重荧光PCR检测试剂盒482-Fluoroadenosine1468
豚鼠组胺(HIS)ELISAKit Altrenogest 850-52-2 中文名:烯丙孕素 分子式:C21H26O2
豚鼠转化生长因子β1elisa试剂盒 豚鼠转化生长因子β1试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠转化生长因子β1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠转化生长因子β1试剂盒、豚鼠转化生长因子β1eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Amorolfine 78613-38-4 中文名:盐酸阿莫洛芬 分子式:C21H36ClNO
豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 Amorolfine 67467-83-8 中文名:阿莫罗芬 分子式:C21H36ClNO
豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISAKit alpha-Terthienylmethanol 中文名: 分子式:C13H10OS3 度:%
豚鼠主要组织相容性复合体elisa试剂盒 豚鼠主要组织相容性复合体试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠主要组织相容性复合体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠主要组织相容性复合体试剂盒、豚鼠主要组织相容性复合体eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Lenalidomide 191732⁻⁷2-6 中文名:来那度胺 分子式:C13H13N3O3
血液miRNA提取试剂盒2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名:N-乙酰氨基葡萄糖 分子式:C8H15NO6 度:99.0% 小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒
2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoqui 中文名:2-氨基-3-氯-1,4-萘醌 分子式:C10H6ClNO2 度:99.0% 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISAKit
2-Amino-6-chlorobenzothiazole 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:99.0% 小鼠上腺素(EPI)ELISAKit
Solvent Yellow 3 中文名:溶剂黄 分子式:C14H15N3 度:99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit
3-Acetylcoumarin 中文名:3-乙酰基 分子式:C11H8O3 度:99.0% 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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