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植物RNA提取试剂盒(含DNase I)
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详细内容
本试剂盒用于从各种植物中提取纯化高品质总RNA,也适用于真菌菌丝RNA的提取。独特的Shredder分离柱,用于匀质化和过滤高粘度的植物或真菌裂解物,同时采用硅基质膜吸附RNA进行纯化,使多聚糖等各种污染物通过洗涤被有效去除,经洗脱的RNA可直接用于各种下游实验。由本试剂盒提取RNA分子量大于200碱基,纯度高,几乎无DNA残留。如果是对微量DNA非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除。提取的RNA可用于Northern Blot、Dot Blot 、RT-PC

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 植物RNA提取试剂盒(含DNase I) | RNAtiqu Plant RNA Extraction Kit(DNase I) | 50次 |
产品仅用于科研保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA用)。
实验准备及重要注意事项:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 配制溶液应使用无RNase的水。
③ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 玻璃器皿应在使用于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
③ 配制溶液应使用无RNase的水。
④ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
3、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取的量和质量。
4、Buffer RL在使用请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。Buffer RLC使用时不需加β-巯基乙醇。
5、次使用应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
6、Buffer RL和Buffer RLC如果产生沉淀,请加热使其溶解后室温放置。
7、所有离心步骤均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
腔肠素cp2ug2-Amino'-fluorobenzophe30/6/4
腔肠素f2 µgEnalapril maleate7956马来酸依那普利
腔肠素h2 µgPioglitazone 1125295盐酸吡格列酮
腔肠素hcp2 µgAmlodipine besylate11149苯磺酸氨氯地平
腔肠素n2 µgSulfamethoxazole7236磺胺甲噁唑
兔子巨噬细胞炎性蛋白1αelisa试剂盒 兔子巨噬细胞炎性蛋白1α试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子巨噬细胞炎性蛋白1α试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔子巨噬细胞炎性蛋白1α试剂盒、兔子巨噬细胞炎性蛋白1α elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 7α-Hydroxysitosterol 34427-61⁻⁷ 中文名:7α-羟基谷甾醇 分子式:C29H50O2 度:95.0% 关键词: 甘蔗; 菠萝; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
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兔子胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒 7-Oxo-β-sitosterol 2034⁻⁷4-4 中文名:7-氧代-β-谷甾醇 分子式:C29H48O2 度:98.0% 关键词: 抗高血压; 松属; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
兔子胶原酶II(CollagenaseII)ELISAKit 7α-Hydroxystigmasterol 中文名:7α-羟基豆甾醇 分子式:C29H48O2 度:%
兔子胶原酶II(Collagenase II)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 (S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO 度:99.0%
植物RNA提取试剂盒(含DNase I)3-Aminoadamantan-1-ol 中文名: 分子式:C10H17NO 度:98.0% DeoxycholicAcid,Salt 50g
Raltegravir 中文名:雷特格韦 分子式:C20H21FN6O5 度:98.0% 焦碳酸二乙脂 10ml
Vildagliptin 中文名:维达列汀 分子式:C17H25N3O2 度:98.0% DEPC 100ml
1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile 中文名: 分子式:C7H9ClN2O 度:98.0% 豚鼠组胺elisa试剂盒 豚鼠组胺试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠组胺试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠组胺试剂盒、豚鼠组胺eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Loratadine 中文名:氯雷他定 分子式:C22H23ClN2O2 度:98.0% 豚鼠转化生长因子β1elisa试剂盒 豚鼠转化生长因子β1试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠转化生长因子β1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠转化生长因子β1试剂盒、豚鼠转化生长因子β1eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
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