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鱼类组织DNA提取试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:23
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详细内容
本试剂盒采用独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。本试剂盒适用于快速提取各种鱼类、虾类、扇贝等组织基因组DNA。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 鱼类组织DNA提取试剂盒 | Fish tissue DNA Extraction Kit | 50次|100次 |
注意事项：
洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH 大于7.5， pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在－20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用TE 缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mMEDTA，pH 8.0），但是EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
操作步骤：（实验请先阅读注意事项）
提示：次使用请先在漂洗液WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
1. 切取不多于30mg 的组织材料，放入装有180μl 组织裂解液SL 的1.5ml 离心管中，涡旋振荡15 。
根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果裂解困难，可先用液氮研磨。
2. 加入20μl 的蛋白酶K 溶液(20mg/ml)，立刻涡旋振荡充分混匀。将裂解物放置在55℃水浴1-3 小时或者直到组织消化完全。
不同组织裂解时间不同，通常需0.5–2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15。
可选做步骤: 如果RNA 残留较多，需要去除RNA，可在完成步骤2 后加20μlRNase A(25mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10 分钟。
3. 加入200μl 结合液CB，立刻涡旋振荡充分混匀，70℃放置10分钟。
4. 冷却后加100μl 异丙醇，充分颠倒或涡旋振荡充分混匀，此时可能出现絮状沉淀。
5. 将上一步混合物和可能的沉淀都加入一个吸附柱AC 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 离心60 ，倒掉收集管中的废液。
如果有不溶组织物可能堵住枪头，可将枪头在吸水纸上轻蹭去除不溶物；如果吸上来的混合物少则可以将枪头和不溶物一起弃去，该做法是为了去除不溶物，以免堵塞离心柱。
上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15混匀。
6. 加入500μl 抑制物去除液IR，12000rpm 离心30 ，弃废液。
7. 加入700μl 漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心30，弃掉废液。
8. 加入500μl 漂洗液WB，12000rpm 离心30 ，弃掉废液。
9. 将吸附柱AC 放回空收集管中，13,000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10. 取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100μl 洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65⁻⁷0℃水浴中预热效果更好），室温放置3-5 分钟，12000rpm 离心1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2 分钟，12000rpm 离心1 分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是小体积不应少于50μl，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。
11. DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。
储存条件：室温，有效期12个月。
人透明质酸酶(HAase)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:Hyaluronic Lase Human HAase(Hyaluronidase) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组HAase浓度
人乙醇脱氢酶1(ADH1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:ADH1A, Alcohol dehydrogenase 1A(class I) , alpha polypeptide Human ADH1(Alcohol Dehydrogenase 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组ADH1浓度
人三叶因子1(TFF1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:TFF1, BCEI, D21S21, HP1.A, HPS2, pNR-2, pS2, trefoil factor 1 Human TFF1(Trefoil Factor 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组TFF1浓度
Toltrazuril 69004-03-1 中文名：托曲珠利 分子式：C18H14F3N3O4S 度：98.0% 小鼠游离列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒
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Tokinolide B 112966-16-2 中文名： 分子式：C24H28O4 度：96.0% 关键词： 小鼠游离睾(F-TESTO)ELISA试剂盒
Tofacitinib 540737-29-9 中文名：枸橼酸托法替尼 分子式：C22H28N6O8 度：98.0% 小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒
Tiotropium bromide 136310-93-5 中文名：噻托溴铵 分子式：C19H22NO4S2 度：98.0% 关键词： 小鼠游离睾elisa试剂盒 小鼠游离睾试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠游离睾试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠游离睾试剂盒、小鼠游离睾elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
鱼类组织DNA提取试剂盒Taxilluside A 1661914-46-0 中文名： 分子式：C18H24O10 Humancytovillin/ezrin,CVLELISA试剂盒人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
n-Butyl β-D-fructofuranoside 80971-60-4 中文名：基-β-D-果糖苷 分子式：C10H20O6 组织INSULI激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Palmitone 502⁻⁷3-8 中文名：棕榈酮 分子式：C31H62O Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 54232-58-5 中文名： 分子式：C18H30O3 兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Acetylatractylodinol 61582-39-6 中文名：乙酰苍术素醇 分子式：C15H12O3 Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA试剂盒
操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
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