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凝胶法内毒素半定量试剂盒
价格:¥ 电议
品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/15 9:32:24
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详细内容
产品属性:
中文名称:凝胶法内毒素半定量试剂盒
英文名称:Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)
产品规格:10×0.1mL
本试剂盒又称鲎试剂,为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。
储存条件:常温运输,阴凉处避光保存,有效期两年。
使用方法:
一、样品溶液的制备
样品的pH值应在6.0–8.0 之间,若超出此范围,需用无热原缓冲液或0.1N氢氧化钠、0.1N 盐酸调节。若样品中可能存在鲎实验的干扰物质,见本说明书4.2“样品的干扰实验”。若样品中可能含有导致鲎试剂中G 因子旁路反应的(1,3)β-D-葡聚糖,需选用不会对(1,3)β-D-葡聚糖起反应的特异性鲎试剂。
二:细菌内毒素标准溶液及对照液的准备
2.1细菌内毒素标准溶液(本试剂盒不提供)
取细菌内毒素工作标准品1支,按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ ,1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列内毒素标准溶液(λ为鲎试剂灵敏度标示值)。备用。
注:鲎试剂灵敏度复核实验见本手册其他常用实验方案。
2.2 阴性对照液:即无内毒素水。
2.3 阳性对照液:即浓度为2λ的内毒素标准溶液。
2.4样品阳性对照液:即添加浓度为2λ内毒素标准的样品溶液。
三:内毒素检测
3.1 鲎试剂的溶解:按标示量(本试剂盒为0.1mL/支)加无内毒素水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要引起气泡,溶解后的试剂应在10 min内使用(即配即用)。
3.2样品溶液的制备
样品大有效稀释倍数(MVD)的计算:
MVD= C?L/λ
λ:测试用鲎试剂灵敏度标示值(EU/mL);L:样品细菌内毒素限值;C:样品浓度或样品复溶后所得样品浓度。当L 单位为EU/mL(溶液)时,C的单位为1mL/mL;当L单位为EU/mg或者EU/U时,C的单位为mg/mL或者U/mL。按照计算所得体积,加无内毒素水制备样品溶液。
3.3 各反应管中分别加入0.1mL 阴性对照液,阳性对照液,样品,或样品阳性对照液。
封闭管口,轻轻摇匀,垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟,温育期间避免振动。
3.4 结果判断
3.4.1 将试管从恒温器中轻轻取出,缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶,不变形,不从管壁滑脱为阳性,记录为(+);不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性,记录为(-)。
3.4.2 只有当阴性对照管结果均为阴性,阳性对照管、样品阳性对照管结果均为阳性,实验方有效,否则无效。若阴性对照管为阳性,提示鲎试剂、无内毒素水或实验器具可能受到污染。若阳性对照管为阴性,提示鲎试剂活性减失、内毒素标准溶液效价降低,鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确,或内毒素标准溶液的稀释不正确。若样品阳性对照管为阴性,提示反应体系内有干扰因素存在。

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