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柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)
价格:¥ 电议
品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/15 9:32:24
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详细内容
本试剂盒在柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN70901)基础上改良而得大提升产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法) | Fungus DNA Column large-scale extraction kit(Glass bead method) | 4次 |
产品特点:
1.处理量大,一次可以处理1-3g 各种真菌组织。
2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
3. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。
4.产率一般在10-100μg/g真菌样品。离心吸附柱大吸附量为800μg。
5. DNA片段长度一般在20-40kb左右。
6.适用范围广,适用于度大多数真菌材料,包括酵母(S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris)等。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

使用方法:
1. 对菌液:取60-100mL 过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约1 g),转移到装有20mL 无菌水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料,一般取1-3g左右,直接加入到离心管中,在材料中加入无菌水20mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
4.沉淀中加入10mL溶液A和10 克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟,可以延长震荡时间。
5. 加入10mL的溶液B,涡旋震荡5分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个50mL的干净的塑料离心管中。
6.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
7. 将20mL 通用洗柱液加入离心柱,12000rpm离心1分钟,弃穿透液。
8. 重复上步操作一次。
9. 12000rpm 空甩1分钟去除残留液体。
10. 将离心柱放置在一新的50mL塑料离心管中,加入500μL DNA 洗脱液2.0。
11.室温放置5分钟后12000rpm离心1分钟,管底即为真菌DNA样品,吸取离心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上,离心洗脱以收集更多的DNA。
12. 所得DNA可立即使用,也可长期保存在-20℃。
13. 注:如离心机转速不能达到12000rpm,可以用大转速离心10-15min 代替12000rpm离心1-2min。
人脂肪酸合酶(FASN)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:FAS, OA-519, SDR27X1 Human FASN(Fatty Acid Synthase) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组FASN浓度
人血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1/CD31)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:Platelet endothelial cell adhesion molecule,PECAM-1,cluster of differentiation 31,CD31,CD31/EndoCAM, GPIIA', PECA1, PECAM-1, endoCAM Human PECAM1/CD31(Platelet/Endothelial Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PECAM1/CD31浓度
人血管生成素(ANG)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:ALS9, HEL168, RNASE4, RNASE5 Human ANG(Angiogenin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组ANG浓度
Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol 289056-24-2 中文名: 分子式:C29H50O3 HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Sitosteryl palmitate 2308-85-2 中文名:β-谷甾醇棕榈酸酯 分子式:C45H80O2 兔子红细胞生成素(EPO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
22-Dehydroclerosterol glucoside 143815-99-0 中文名: 分子式:C35H56O6 Human thymus depende aigen (TD-Ag) ELISA Kit 人胸腺依赖性抗原(TD-Ag)ELISA试剂盒
22-Dehydroclerosterol 26315-07-1 中文名:22-去氢赤桐甾醇 分子式:C29H46O Humanai-redcellaibodyELISAKit 人抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Stigmastane-3β,5α,6β-triol 20835-91-0 中文名:豆甾-3β,5α,6β-三醇 分子式:C29H52O3 humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember2ELISA试剂盒人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员2(EAR2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)Aspergillon A 2239299-08-0 中文名: 分子式:C22H32O Humanelecon-ansfer-flavoproteinbetapolypeptide,ETFBELISA试剂盒人电子转移黄素蛋白β肽(ETFB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Convallagenin B 17934-59⁻⁷ 中文名:铃兰皂苷元B 分子式:C27H44O6 组织PI3K激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Glycoursodeoxycholic acid 64480-66-6 中文名:甘氨熊脱氧胆酸 分子式:C26H43NO5 Humanpeptidemajorhistocompatibilitycomplex,pMHCELISAKit人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Periplocin 13137-64-9 中文名:杠柳毒苷 分子式:C36H56O13 兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Periplogenin 514-39-6 中文名:杠柳苷元 分子式:C23H34O5 Human hea fatty acid binding protein (h-FABP) ELISA Kit 人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA试剂盒
操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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