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柱式土壤DNA提取试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 9:32:24
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详细内容
本试剂盒门用于从各种土壤样品和河海沉积物中提取高质量的DNA的试剂。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 柱式土壤DNA提取试剂盒 | Soil DNA column extraction kit | 50次 |
试剂盒特点：
1. 去污染效果更好，得到的DNA可以直接作为PCR模板或酶切，不需要再进行去腐殖酸处理。
2. 操作过程更加简单快速，整个操作只需要10多分钟，扩容性好。
3.产量高，每克土壤一般可以提取到5-50μg DNA，片段长度在20-50 Kb，OD260/280一般都在1.8以上。
4.适合于各种土壤(包括河海沉积物)。
储存条件：常温运输及保存，保存期为一年。
使用方法：
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后充分混匀，取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取0.1-0.3 g的土壤，加入到含预热溶液A的离心管中，震荡器上剧烈震荡5-10分钟。如果是扩量操作，可以使用更多土壤和较大离心管。也可以将同一种土壤在较大离心管中震荡处理，然后再分到1.5mL离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管，一定要让管底的土壤震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 12000～15000g室温离心3分钟，将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色，实际颜色取决于腐殖酸的含量，上清液的体积一般为300-400μl)。
5.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL离心管中，上清液颜色将比第4步得到的上清的颜色稍淡，体积在0.7mL左右。
注意：下面第8-第9步的抽提操作可以省略，直接进入第10步，但DNA的产量会低50%左右，OD260/280在1.7-1.8。如果直接进入第10步，则转移的溶液体积不要超过0.6mL，否则没有空间加溶液C。
8. 加入0.2mL的(自备)，震荡器上充分振荡30混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 12000～15000g室温离心3分钟，小心转移上清到新离心管中。说明：离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。上清的颜色取决于土壤中腐殖酸的含量。将上清转移到新的1.5mL离心管时，不要超过0.6mL，否则没有空间加溶液C。如果有多余的可以弃之不用。
10. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30混匀。
11. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液)。
12. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。
13. 如果有必要，可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心半分钟，弃穿透液。增加一步洗涤能使后得到的DNA的纯度稍有提高，但产量稍微有所降低。
14. 12000～15000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入50-100μL DNA洗脱液2.0。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17. 12000～15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。
操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL/TNFSF10)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:APO2L, Apo2-L, TL2, CD253 Human TRAIL/TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组TRAIL/TNFSF10浓度
人血管抑素(ANG)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:ANG, Angiostatin Human ANG(Angiostatin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组ANG浓度
人S100钙结合蛋白A8(S100A8)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:60B8AG, CAGA, CFAG, CGLA, CP-10, L1Ag, MA387, MIF, MRP8, NIF, P8, Calgranulin A Human S100A8(S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组S100A8浓度
Sprengerinin A 中文名： 分子式：C38H60O12 植物25羟基维生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA试剂盒
Spongouridine 中文名：阿糖尿苷 分子式：C9H12N2O6 鱼脱酶3（DIO3）ELISA检测试剂盒 96T/48T ELISA 组装/原装
Soyacerebroside II 中文名：大豆脑苷II 分子式：C40H75NO9 鱼脱酶2（DIO2）ELISA检测试剂盒 96T/48T ELISA 组装/原装
Soyacerebroside I 中文名： 分子式：C40H75NO9 植物钙调素(CAM)ELISA试剂盒
Sorafenib tosylate 中文名：索拉非尼 分子式：C28H24ClF3N4O6S 植物钙调0酸酶（CaN）ELISA试剂盒
柱式土壤DNA提取试剂盒Sarmentocymarin 98633-61-5 中文名： 分子式：C30H46O8 HumanEndostatin,ESELISA试剂盒人内皮抑素(ES)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Cryptanoside A 98570-81-1 中文名： 分子式：C30H42O10 组织PKCβ1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Timosaponin B-II 136656-07-0 中文名：知母皂苷B-II 分子式：C45H76O19 HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit人落叶型天疱疮抗体(PF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Tenacissoside H 191729-45-0 中文名：通关藤苷H 分子式：C42H66O14 兔子胶原酶II(Collagenase II)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Tauroursodeoxycholic acid 14605-22-2 中文名：牛磺熊去氧胆酸 分子式：C26H45NO6S Human thymidylate syhase (TS) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶(TS)ELISA试剂盒
热门标签：柱式土壤DNA提取试剂盒
