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5×双色蛋白上样缓冲液(还原)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/11/5 9:41:34
产品摘要：5×双色蛋白上样缓冲液(还原)正在出售的产品：INSULIN 蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次大鼠双氢睾酮（DHT）ELISA试剂盒,
细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次大鼠糖蛋白130（gp130）ELISA
细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次大鼠糖蛋白130（gp130）ELISA
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详细内容
产品属性：
中文名称：5×双色蛋白上样缓冲液(还原)
英文名称：5×DualColor Protein loading buffer (reducing)
产品规格：10mL
产品货号：GOY-F11243
中文名称：5×双色蛋白上样缓冲液(还原)
英文名称：5×DualColor Protein loading buffer (reducing)
产品规格：10mL
产品货号：GOY-F11243
| 本制品是5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有两种示踪染料：溴酚蓝和吡啰红Y，可以指示SDS-PAGE电泳过程以及Weastern blot的转膜效率。该缓冲液已经加入DTT，可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂，经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。 保存：-20℃。 操作步骤： 融化-混合-变性-上样 将5×双色蛋白上样缓冲液37℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。 将缓冲液与蛋白样品按照1:4的比例混匀。 将蛋白样品置于95℃中加热5分钟。 待蛋白样品充分变性后冷却至室温，快甩离心收集到管底，直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内电泳。 注意事项： 由于含有DTT，该缓冲液不适合于Native SDS-PAGE电泳。非变性电泳请选择4×Native-PAGE protein loading buffer 一般说来，电泳中吡啰红Y泳动速度快于溴酚蓝，但在高浓度SDS-PAGE胶中(高于15%分离胶)，吡啰红Y泳动速度慢于溴酚蓝。 |
注意事项：
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。*消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会
影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合。消化时将*铺满孔板底后，轻摇时*与细胞充分接触，然后倒掉大部分*，利用剩余的少量*再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，而不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
实验要点:
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
定量检测试剂盒鸡N-酰-β-D-氨葡萄糖苷酶(NAG)Elisa测定试剂盒
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之必须预热。
2．在适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用*和的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的异戊醇（*—异戊醇=25:24:1），异戊醇的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
操作流程:
1.根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
定量检测试剂盒鸡N-酰-β-D-氨葡萄糖苷酶(NAG)Elisa测定试剂盒
细胞冠状病毒3C类蛋白酶（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性20次鸡神经胶质纤维性蛋白（GFAP）Elisa测定试剂盒
荧光淬灭法定量检测试剂盒兔半胱氨蛋白酶抑制剂/胱抑素C（Cys-C）Elisa测定试剂盒
组织冠状病毒3C类蛋白酶（SARS -CoV 3C-like PROTEASE）活性20次芳香化酶/色素P450/P450抗体流式免疫组化
荧光淬灭法定量检测试剂盒人瘤病16型E7抗体流式免疫组化
细胞艾滋病毒1蛋白酶（HIV-1 PROTEASE）活性荧光淬灭法20次原癌因H-ras抗体流式免疫组化
定量检测试剂盒荷尔蒙敏感脂肪抗体流式免疫组化
组织艾滋病毒1蛋白酶（HIV-1 PROTEASE）活性荧光淬灭法20次蛋白激酶N2抗体流式免疫组化
定量检测试剂盒激素受体相关蛋白16抗体流式免疫组化
细胞切割酶/β分泌酶（MENAPSIN 2；β－SECRETASE）活性20次D-脯氨
荧光淬灭法定量检测试剂盒链霉蛋白酶
组织切割酶/β分泌酶（MENAPSIN 2；β－SECRETASE）活性20次5´-核苷酶
荧光淬灭法定量检测试剂盒牛血清白蛋白（第五组份）
细胞蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒20次盐林可霉素
组织蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒20次硫巴龙霉素
phospho-c-Raf (Ser289) 化原癌因c-Raf抗体咪唑烟 分析标准品
phospho-c-Raf (Ser259) 化原癌因c-Raf抗体立枯 分析标准品，98%
phospho-c-Raf (Ser296) 化原癌因c-Raf抗体双组份无吡啶滴定剂 5mg水/ml,测含水量较高样品。 2瓶500毫升为
phospho-c-Raf (Ser338) 化原癌因c-Raf抗体双组份无吡啶滴定剂 3mg水/ml,测常规样品
RASGRF1 Ras特异性鸟嘌呤核苷释放因子1双组份无吡啶滴定剂 2mg水/ml,测含水量较低样品
Phospho-RasGRF1 (Ser916) 化Ras特异性鸟嘌呤核苷释放因子1双组份无吡啶滴定剂 1mg水/ml,测含水量较低样品
RAR-Alpha 维受体-α 抗体双组份无吡啶溶剂 用作反应介质
RAR Beta 维受体β抗体容量法双组份含吡啶溶液A 3mg水/1mlA+B,测定常规样品
5×双色蛋白上样缓冲液(还原)别：BR
5×双色蛋白上样缓冲液(还原)别：BR
含量：≥99.0%
熔点：≥200℃
干燥失重：≤0.5%
性状(以下信息仅供参考)：白色或类白色结晶粉末，溶液澄清无色（1g溶于10ml乙腈)。有研究表明，HBTU无论基结晶还是溶液状态，均为胍正离子，而非脲正离子。
用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)作为多肽缩合剂使用时，其优点为：低的消旋概率、反应条件简单、反应时间短以及较高的产率。
保存：RT
N-乙酰-L-蛋氨酸
热门标签：5×双色蛋白上样缓冲液(还原)
